产品名称 | 大鼠外周血淋巴细胞 | 组织来源 | 血液组织 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 包装 | T25培养瓶 |
货号 | GOY-01X1401 | 细胞形态 | 圆形 |
大鼠外周血淋巴分离自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。淋巴细胞（lymphocyte）是白细胞的一种，是体积最小的白细胞。其由淋巴器官产生，主要存在于淋巴管中循环的淋巴液中，是机体免疫应答功能的重要细胞成分，是淋巴系统几乎全部免疫功能的主要执行者，是对抗外界感染和监控体内细胞变异的一线“士兵"。淋巴细胞是一类具有免疫识别功能的细胞系，按其发生迁移、表面分子和功能的不同，可分为T淋巴细胞（又名T细胞）、B淋巴细胞（又名B细胞）和自然杀伤（NK）细胞。T细胞和B细胞都是抗原特异性淋巴细胞，它们的最初来源是相同的，都来自造血组织。T淋巴细胞随血循环到胸腺，在胸腺激素等的作用下成熟，而B细胞在骨髓中分化成熟。当受抗原刺激后，T淋巴细胞即转化为淋巴母细胞，再分化为致敏T淋巴细胞，参与细胞免疫，其免疫功能主要是抗胞内感染、瘤细胞与异体细胞等；而B淋巴细胞是先转化为浆母细胞，再分化为浆细胞，产生并分泌免疫球蛋白（抗体），参与体液免疫，其功能是产生抗体，提呈抗原，以及分泌细胞内因子参与免疫调节；NK细胞不依赖抗原刺激而自发地发挥细胞毒效应，具有杀伤靶细胞的作用。
方法简介：
公司实验室分离的大鼠外周血淋巴采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的大鼠外周血淋巴经过检测，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
本公司所有产品仅供科学实验，不做其他科学实验外的使用！
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 悬浮
细胞形态 圆形
传代特性 不增殖；不传代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
准备工作
1. 实验器材准备：准备无菌的培养皿、培养瓶、移液管、离心管、手术器械等，并进行高压灭菌或其他合适的消毒处理。
2. 试剂准备：配制或购买合适的培养基、消化酶（如、胶原酶等）、胎牛血清、双抗等试剂，确保其无菌且在有效期内。
3. 实验动物或组织来源准备：根据实验需求，选择合适的动物并进行相应的麻醉或处死，获取所需组织；或从已有的组织样本库中获取组织。
取材与处理
1. 取材：在无菌条件下，迅速取出目标组织，尽量减少对组织的损伤，并去除多余的脂肪、结缔组织等非目的组织。
2. 清洗：将取出的组织用预冷的无菌PBS冲洗数次，以去除血液和杂质。
3. 剪切：将组织剪成约1 - 2mm³的小块，以便后续消化。
细胞分离
1. 消化：将剪碎的组织块放入含有适量消化酶的离心管中，在37℃恒温摇床或培养箱中消化一段时间。期间可轻轻摇晃离心管，使消化更均匀。
2. 终止消化：当组织块大部分被消化成单细胞悬液或小细胞团时，加入含血清的培养基终止消化。
3. 过滤与离心：用细胞筛过滤细胞悬液，去除未消化的组织碎片，然后将滤液以适当的转速离心，收集细胞沉淀。
细胞观察与检测
1. 日常观察：每天用倒置显微镜观察细胞的形态、生长状态、密度等，记录细胞的变化情况，如发现细胞污染或异常，及时采取相应措施。
2. 细胞计数与活力检测：在需要时，可采用台盼蓝染色等方法对细胞进行计数和活力检测，以了解细胞的生长情况和健康状态。
一、取材与分离
1. 快速操作
- 组织取材后需立即处理，避免长时间暴露于室温或非营养环境。
- 使用无菌 PBS 或生理盐水冲洗组织，去除血液、杂质。
2. 消化酶选择
- 根据组织类型选择消化酶，避免过度消化导致细胞损伤。
- 消化时间需严格控制（通常 10-30 分钟），可通过显微镜观察细胞解离状态。
二、培养条件优化
1. 培养基选择
- 使用含血清或特定生长因子的培养基（如 DMEM、RPMI 1640 等），部分细胞需添加胰岛素、EGF 等。
- 避免频繁更换培养基品牌或批次，减少细胞适应压力。
2. 贴壁与传代
- 原代细胞贴壁能力较弱，可能需要包被培养皿（如胶原蛋白、多聚赖氨酸）。
- 传代时密度建议控制在 70%-80%，过度汇合会导致接触抑制和分化。
三、污染控制
1. 无菌操作
- 全程在超净台操作，使用一次性耗材，避免交叉污染。
- 培养基中可添加双抗，但长期使用可能影响细胞活性。
2. 支原体检测
- 定期检测支原体污染（如 PCR 法），污染后需及时丢弃细胞。
四、状态监控
1. 日常观察
- 每天检查细胞形态、密度及培养基颜色，及时更换培养基（通常每 2-3 天换液一次）。
- 异常形态（如细胞变圆、碎片增多）可能提示污染或营养不足。
2. 传代与冻存
- 原代细胞分裂次数有限（一般 5-10 代），需及时冻存早期代次细胞。
- 冻存液建议使用 DMSO+血清（或专用冻存培养基），梯度降温后液氮保存。
人食管癌细胞；NEC | 人膀胱鳞癌细胞；SCaBER |
人肺鳞癌细胞；SK-MES-1 | SAlexa Fluor 640标记的兔抗牛IgG |
小鼠胚胎成纤维细胞；PA317 | SAlexa Fluor 660标记的兔抗牛IgG |
人胚胎胰腺组织来源细胞；CCC-HPE-2 | SAlexa Fluor 750标记的兔抗牛IgG |
人神经上皮瘤细胞；SK-N-MC | SAlexa Fluor 680标记的兔抗牛IgG |
人乳腺导管癌细胞；T47D[T-47D] | Cy3.5标记的兔抗牛IgG |
人横纹肌肉瘤细胞；TE671SublineNo.2 | SAlexa Fluor 594标记的兔抗猴IgG |
大鼠破骨细胞 | SAlexa Fluor 633标记的兔抗猴IgG |
人胶质瘤细胞；TJ905 | SAlexa Fluor 633标记的兔抗牛IgG |
人髓样甲状腺肿瘤细胞；TT | SAlexa Fluor 594标记的兔抗牛IgG |
荧光转染人成骨肉瘤细胞；U2OS-LucteT-on | Cy3.5标记的羊抗牛IgG |
人涎腺腺样囊性癌细胞；ACC-2 | SAlexa Fluor 750标记的羊抗牛IgG |
人原位胰腺腺癌细胞；BxPC-3 | 大鼠外周血淋巴细胞SAlexa Fluor 680标记的羊抗牛IgG |
人视网膜母细胞瘤；Y79 | SAlexa Fluor 660标记的羊抗牛IgG |
96孔板 圆底 PVC(聚氯乙烯)材质 无盖 未灭菌 袋装 | SAlexa Fluor 640标记的羊抗牛IgG |
