小鼠脉络膜血管内皮分离自眼球脉络膜组织；脉络膜在视网膜和巩膜之间，含有丰富血管和色素细胞，对外力冲击的耐受性较视网膜差，当眼球受到从前面来的外力的冲击作用通过玻璃体传到后极部时，坚硬的巩膜在其外面又有抵抗作用，使脉络膜在内外两种作用夹攻下而发生破裂和出血。脉络膜呈暗褐色，围绕视神经乳头部有照膜，为青绿色带金属光泽的三角形区。脉络膜是眼球中膜的后2/3处的薄膜，由纤维组织、小血管和毛细血管组成，软而薄，棕红色，在巩膜和视网膜之间，续连于睫状体后方。脉络膜的血循环营养视网膜外层，其含有的丰富色素起遮光暗房作用。主要功能是营养视网膜外层及玻璃体，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同时对视觉系统起保护作用，对整个视觉神经有调节作用。续连于睫状体后方，含丰富的血管和色素细胞，有营养和遮光作用。
方法简介：
公司实验室分离的小鼠脉络膜血管内皮采用胶原酶-中性dan白酶混合消化法并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的小鼠脉络膜血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 小鼠脉络膜血管内皮细胞 | 组织来源 | 脉络膜组织 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 包装 | T25培养瓶 |
货号 | GOY-01X1077 | 细胞形态 | 内皮细胞样 |
本公司所有产品仅供科学实验，不做其他科学实验外的使用！
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
准备工作
1. 实验器材准备：准备无菌的培养皿、培养瓶、移液管、离心管、手术器械等，并进行高压灭菌或其他合适的消毒处理。
2. 试剂准备：配制或购买合适的培养基、消化酶（如、胶原酶等）、胎牛血清、双抗等试剂，确保其无菌且在有效期内。
3. 实验动物或组织来源准备：根据实验需求，选择合适的动物并进行相应的麻醉或处死，获取所需组织；或从已有的组织样本库中获取组织。
取材与处理
1. 取材：在无菌条件下，迅速取出目标组织，尽量减少对组织的损伤，并去除多余的脂肪、结缔组织等非目的组织。
2. 清洗：将取出的组织用预冷的无菌PBS冲洗数次，以去除血液和杂质。
3. 剪切：将组织剪成约1 - 2mm³的小块，以便后续消化。
细胞分离
1. 消化：将剪碎的组织块放入含有适量消化酶的离心管中，在37℃恒温摇床或培养箱中消化一段时间。期间可轻轻摇晃离心管，使消化更均匀。
2. 终止消化：当组织块大部分被消化成单细胞悬液或小细胞团时，加入含血清的培养基终止消化。
3. 过滤与离心：用细胞筛过滤细胞悬液，去除未消化的组织碎片，然后将滤液以适当的转速离心，收集细胞沉淀。
细胞观察与检测
1. 日常观察：每天用倒置显微镜观察细胞的形态、生长状态、密度等，记录细胞的变化情况，如发现细胞污染或异常，及时采取相应措施。
2. 细胞计数与活力检测：在需要时，可采用台盼蓝染色等方法对细胞进行计数和活力检测，以了解细胞的生长情况和健康状态。
一、取材与分离
1. 快速操作
- 组织取材后需立即处理，避免长时间暴露于室温或非营养环境。
- 使用无菌 PBS 或生理盐水冲洗组织，去除血液、杂质。
2. 消化酶选择
- 根据组织类型选择消化酶，避免过度消化导致细胞损伤。
- 消化时间需严格控制（通常 10-30 分钟），可通过显微镜观察细胞解离状态。
二、培养条件优化
1. 培养基选择
- 使用含血清或特定生长因子的培养基（如 DMEM、RPMI 1640 等），部分细胞需添加胰岛素、EGF 等。
- 避免频繁更换培养基品牌或批次，减少细胞适应压力。
2. 贴壁与传代
- 原代细胞贴壁能力较弱，可能需要包被培养皿（如胶原蛋白、多聚赖氨酸）。
- 传代时密度建议控制在 70%-80%，过度汇合会导致接触抑制和分化。
三、污染控制
1. 无菌操作
- 全程在超净台操作，使用一次性耗材，避免交叉污染。
- 培养基中可添加双抗，但长期使用可能影响细胞活性。
2. 支原体检测
- 定期检测支原体污染（如 PCR 法），污染后需及时丢弃细胞。
四、状态监控
1. 日常观察
- 每天检查细胞形态、密度及培养基颜色，及时更换培养基（通常每 2-3 天换液一次）。
- 异常形态（如细胞变圆、碎片增多）可能提示污染或营养不足。
2. 传代与冻存
- 原代细胞分裂次数有限（一般 5-10 代），需及时冻存早期代次细胞。
- 冻存液建议使用 DMSO+血清（或专用冻存培养基），梯度降温后液氮保存。
小鼠杂交瘤细胞；IIA8 | 小鼠杂交瘤细胞；IIF1D2C8F11 |
小鼠杂交瘤细胞；IE9B2F9F4 | 1.5ml螺口带盖离心管，彩色盖，可立，带O型环，聚丙烯，未灭菌 |
小鼠杂交瘤细胞；IIA3 | 1.5ml螺口带盖离心管，彩色盖，可立，带O型环，聚丙烯，灭菌 |
抗人TATA框结合蛋白交互作用蛋白单抗杂交瘤细胞；1C6/B7 | 1.5ml螺口带盖离心管，棕色盖，可立，带O型环，聚丙烯，未灭菌 |
肌动蛋白结合蛋白1B单抗杂交瘤细胞；actin binding protein, 1B | 1.5ml螺口带盖离心管，蓝色盖，可立，带O型环，聚丙烯，未灭菌 |
抗人SH3-结构域结合蛋白单抗杂交瘤细胞；SH3-domain binding protein | 1.5ml螺口带盖离心管，透明盖，可立，带O型环，聚丙烯，未灭菌 |
抗人醛羧A单抗杂交瘤细胞 ；aldolase A | 1.5ml透明螺口带盖离心管，可立，带O型环，DNA储存 |
兔骨膜干细胞 | 1.5ml螺口带盖离心管，透明盖，可立，带O型环，聚丙烯，灭菌 |
抗人环孢菌A-1杂交瘤细胞；CyPA-1 | 1.5ml锥底螺口带盖离心管，红色盖，不可立，带O型环，灭菌 |
抗人谷光甘肽转移单抗FMU-GST 1杂交瘤细胞；FMU-GST 1 | 1.5ml锥底螺口带盖离心管，橘色盖，不可立，带O型环，灭菌 |
抗人肝癌单抗F11杂交瘤细胞；F11 | 1.5ml锥底螺口带盖离心管，绿色盖，不可立，带O型环，灭菌 |
小鼠杂交瘤细胞；3E11F1D8F9 | 1.5ml锥底螺口带盖离心管，绿色盖，不可立，带O型环，聚丙烯，未灭菌 |
小鼠杂交瘤细胞；2A1H1D1D4 | 小鼠脉络膜血管内皮细胞1.5ml锥底螺口带盖离心管，透明盖，不可立，带O型环，聚丙烯，灭菌 |
小鼠杂交瘤细胞；1C7C1E7B9 | 1.5ml锥底螺口带盖离心管，透明盖，不可立，带O型环，聚丙烯，未灭菌 |
可灭菌封瓶膜12cm×12cm | 1.5ml锥底螺口带盖离心管，蓝色盖，不可立，带O型环，灭菌 |
