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| 产品名称 | 人肺微血管内皮细胞 | 组织来源 | 肺组织 |
| 规格 | 5×10⁵ | 包装 | T25培养瓶 |
| 货号 | GOY-01X0673 | 细胞形态 | 内皮细胞样 |
人肺微血管内皮分离自肺组织；肺是机体的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆盖于心之上。肺有分叶，左二右三，共五叶。肺经肺系(指气管、支气管等)与喉、鼻相连，故称喉为肺之门户，鼻为肺之外窍。微血管内皮细胞密切参与包括再生、发育、伤口愈合等一系列生理及炎症反应。细胞呈梭形或多角形，形成单层后呈鹅卵石样或铺路石样排列。肺微血管内皮细胞构成半选择性屏障，该屏障对于肺气体交换，调节液体和可溶物在血液与肺间质之间的流动具有重要意义。
方法简介：
实验室分离的人肺微血管内皮采用组织贴块法并结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测：
实验室分离的人肺微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件PLL（0.1mg/ml）或明胶（0.1%）
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率每2-3天换液一次
生长特性贴壁
细胞形态内皮细胞样
传代特性可传2-3代
消化液0.25%
准备工作
1. 实验器材准备：准备无菌的培养皿、培养瓶、移液管、离心管、手术器械等，并进行高压灭菌或其他合适的消毒处理。
2. 试剂准备：配制或购买合适的培养基、消化酶（如、胶原酶等）、胎牛血清、双抗等试剂，确保其无菌且在有效期内。
3. 实验动物或组织来源准备：根据实验需求，选择合适的动物并进行相应的麻醉或处死，获取所需组织；或从已有的组织样本库中获取组织。
取材与处理
1. 取材：在无菌条件下，迅速取出目标组织，尽量减少对组织的损伤，并去除多余的脂肪、结缔组织等非目的组织。
2. 清洗：将取出的组织用预冷的无菌PBS冲洗数次，以去除血液和杂质。
3. 剪切：将组织剪成约1 - 2mm³的小块，以便后续消化。
细胞分离
1. 消化：将剪碎的组织块放入含有适量消化酶的离心管中，在37℃恒温摇床或培养箱中消化一段时间。期间可轻轻摇晃离心管，使消化更均匀。
2. 终止消化：当组织块大部分被消化成单细胞悬液或小细胞团时，加入含血清的培养基终止消化。
3. 过滤与离心：用细胞筛过滤细胞悬液，去除未消化的组织碎片，然后将滤液以适当的转速离心，收集细胞沉淀。
细胞观察与检测
1. 日常观察：每天用倒置显微镜观察细胞的形态、生长状态、密度等，记录细胞的变化情况，如发现细胞污染或异常，及时采取相应措施。
2. 细胞计数与活力检测：在需要时，可采用台盼蓝染色等方法对细胞进行计数和活力检测，以了解细胞的生长情况和健康状态。
| 鸡外周血淋巴细胞 | BL21(DE3)大肠杆菌 |
| 人肺微血管平滑肌 | BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL |
| 小鼠支气管上皮细胞 | BL21-Star(DE3)pLysS 大肠杆菌 |
| 猪骨髓间充质干细胞 | BL21大肠杆菌表达菌株 |
| 大鼠支气管上皮细胞 | Blastomyces parvus |
| 兔骨髓间充质干细胞 | Botryotinia squamosa |
| 鸡肾小管上皮细胞 | Brucella pecoris |
| 人气管上皮细胞 | BW25113大肠杆菌 |
| 小鼠支气管成纤维细胞 | BY4741 酿酒酵母 |
| 大鼠支气管成纤维细胞 | BY4741酿酒酵母菌 |
| 兔肺成纤维细胞 | B组链球菌 |
| 鸡小肠黏膜上皮细胞 | C43(DE3)pLysS Chemically Competent Cell |
| 小鼠肺大静脉平滑肌细胞 | C58C1 Chemically Competent Cell |
| 鸡气管上皮细胞 | CHS56（含RP4-8质粒）大肠杆菌 |
| 人小气道上皮细胞 | Corynebacterium doosanense |
| 小鼠肺大动脉平滑肌细胞 | Cupriavidus sp. |
| 大鼠肺大动脉平滑肌细胞 | 人肺微血管内皮细胞Cystobasidium minutum |
| 兔肺动脉成纤维细胞 | Cyto-roGFP |
| 鸡骨骼肌细胞 | DB3.1 大肠杆菌 |
| 人肺成纤维细胞 | Dekkera naardenensis |
| 小鼠肺大动脉内皮细胞 | DH10Bac大肠杆菌 |
| 大鼠肺大动脉内皮细胞 | DH10B大肠杆菌 |
| 兔肺泡巨噬细胞 | DH5α（含 pEGFP-N3粒）大肠杆菌 |
| 鸡外周血单核细胞 | DH5α（含 pTrc99a质粒）大肠杆菌 |
一、取材与分离
1. 快速操作
- 组织取材后需立即处理，避免长时间暴露于室温或非营养环境。
- 使用无菌 PBS 或生理盐水冲洗组织，去除血液、杂质。
2. 消化酶选择
- 根据组织类型选择消化酶，避免过度消化导致细胞损伤。
- 消化时间需严格控制（通常 10-30 分钟），可通过显微镜观察细胞解离状态。
二、培养条件优化
1. 培养基选择
- 使用含血清或特定生长因子的培养基（如 DMEM、RPMI 1640 等），部分细胞需添加胰岛素、EGF 等。
- 避免频繁更换培养基品牌或批次，减少细胞适应压力。
2. 贴壁与传代
- 原代细胞贴壁能力较弱，可能需要包被培养皿（如胶原蛋白、多聚赖氨酸）。
- 传代时密度建议控制在 70%-80%，过度汇合会导致接触抑制和分化。
三、污染控制
1. 无菌操作
- 全程在超净台操作，使用一次性耗材，避免交叉污染。
- 培养基中可添加双抗，但长期使用可能影响细胞活性。
2. 支原体检测
- 定期检测支原体污染（如 PCR 法），污染后需及时丢弃细胞。
四、状态监控
1. 日常观察
- 每天检查细胞形态、密度及培养基颜色，及时更换培养基（通常每 2-3 天换液一次）。
- 异常形态（如细胞变圆、碎片增多）可能提示污染或营养不足。
2. 传代与冻存
- 原代细胞分裂次数有限（一般 5-10 代），需及时冻存早期代次细胞。
- 冻存液建议使用 DMSO+血清（或专用冻存培养基），梯度降温后液氮保存。
