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内皮素ELISA试剂盒实验操作流程介绍

更新时间:2022-05-16 点击量:296
       内皮素ELISA试剂盒切勿冷冻,避免阳光直晒。未使用完的酶标板条应密封,2-8℃保存,具有方便、快速、灵敏等特点,因其性质、使用方便、价格低廉等特点。
  检测中样品的处理
  1.细胞培养物上清:细胞培养物于室温000g,离心0分钟后收集上清,并将标本保存于-20℃,且应避免反复冻融。
  2.血清:标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于000g,4℃离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
  3.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂标本采集后30分钟内于2-8℃,000g离心5分钟,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
  内皮素ELISA试剂盒实验操作流程:
  1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
  2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
  3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
  4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
  5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
  6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

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