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产品名称 | 人腹膜毛细血管内皮细胞 | 组织来源 | 腹膜组织 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 包装 | T25培养瓶 |
货号 | GOY-01X0986 | 细胞形态 | 内皮细胞样 |
人腹膜毛细血管内皮分离自腹膜组织；腹膜是存在于高等脊椎动物腹腔中的一层黏膜，主要由间皮细胞和间质（结缔组织、纤维、毛细血管、淋巴管）构成，藉由结缔组织的支持所形成的一层膜状组织。腹膜包覆大部分腹腔内的器官，能分泌黏液润湿脏器的表面，减轻脏器间的摩擦。腹腔脏器的血液、淋巴和神经组织经由腹膜与外界相连；腹膜也具有吸收撞击保护内脏的效果。腹膜（peritoneum）为全身面积最大、配布最复杂的浆膜，由皮及少量结缔组织构成，薄而光滑，呈半透明状。衬于腹、盆腔壁内表面的腹膜称为壁腹膜（parietal-peritoneum）或腹壁薄层；覆盖腹、盆腔器表面的部分称为脏腹膜（visceral-peritoneum）腹膜或腹膜脏层。脏腹膜与壁腹膜互相延续、移行，共同围成不规则的潜在性腔隙，称为腹膜腔（peritoneal-cavity）。腹膜腔是脏、壁两层腹膜之间相互移行围成的潜在性间隙。腹膜腔内有少量浆液，在脏器活动时可减少摩擦。腹膜的主要生理功能：①分泌功能；②吸收功能；③再生能力；④防御功能；⑤调理功能。脏、壁腹膜都有丰富的毛细血管，毛细血管上有不同的孔径；腹膜的毛细血管和毛细血管后静脉是进行溶质交换的主要场所。
方法简介：
公司实验室分离的人腹膜毛细血管内皮采用胶原酶-中性dan白酶联合消化法结合化学试剂抑制法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的人腹膜毛细血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
准备工作
1. 实验器材准备：准备无菌的培养皿、培养瓶、移液管、离心管、手术器械等，并进行高压灭菌或其他合适的消毒处理。
2. 试剂准备：配制或购买合适的培养基、消化酶（如、胶原酶等）、胎牛血清、双抗等试剂，确保其无菌且在有效期内。
3. 实验动物或组织来源准备：根据实验需求，选择合适的动物并进行相应的麻醉或处死，获取所需组织；或从已有的组织样本库中获取组织。
取材与处理
1. 取材：在无菌条件下，迅速取出目标组织，尽量减少对组织的损伤，并去除多余的脂肪、结缔组织等非目的组织。
2. 清洗：将取出的组织用预冷的无菌PBS冲洗数次，以去除血液和杂质。
3. 剪切：将组织剪成约1 - 2mm³的小块，以便后续消化。
细胞分离
1. 消化：将剪碎的组织块放入含有适量消化酶的离心管中，在37℃恒温摇床或培养箱中消化一段时间。期间可轻轻摇晃离心管，使消化更均匀。
2. 终止消化：当组织块大部分被消化成单细胞悬液或小细胞团时，加入含血清的培养基终止消化。
3. 过滤与离心：用细胞筛过滤细胞悬液，去除未消化的组织碎片，然后将滤液以适当的转速离心，收集细胞沉淀。
细胞观察与检测
1. 日常观察：每天用倒置显微镜观察细胞的形态、生长状态、密度等，记录细胞的变化情况，如发现细胞污染或异常，及时采取相应措施。
2. 细胞计数与活力检测：在需要时，可采用台盼蓝染色等方法对细胞进行计数和活力检测，以了解细胞的生长情况和健康状态。
猪骨髓间质干细胞 | 人胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞 |
人鼻粘膜上皮细胞 | 透析袋MD34(7000D) |
人胚胎皮肤细胞 | 透析袋MD44(8000-14000D) |
小鼠心房肌细胞 | 透析袋MD25(8000-14000D) |
人心肌成纤维细胞 | 透析袋MD34(8000-14000D) |
人胚心肌组织来源细胞 | 10-去乙酰紫衫醇 |
大鼠胸主动脉平滑肌细胞 | 硬飞燕草碱 |
KNS-89人脑胶质瘤细胞专用培养基 | 胡黄连苷Ⅲ |
人皮肤基底细胞癌细胞 | 透析袋MD34(3500D) |
小鼠骨髓淋巴细胞 | 拟人参皂苷RT5 |
人急性粒细胞白血病细胞 | 透析袋MD44(3500D) |
人小神经胶质细胞 | Polysaccharide 灵芝多糖 |
永生化食管上皮细胞 | 橙花叔醇(顺+反) |
人成巨核细胞白血病细胞 | 巴卡亭Ⅲ |
绿色荧光核染料(10000×) | 生物标记的兔抗人IgG |
一、取材与分离
1. 快速操作
- 组织取材后需立即处理，避免长时间暴露于室温或非营养环境。
- 使用无菌 PBS 或生理盐水冲洗组织，去除血液、杂质。
2. 消化酶选择
- 根据组织类型选择消化酶，避免过度消化导致细胞损伤。
- 消化时间需严格控制（通常 10-30 分钟），可通过显微镜观察细胞解离状态。
二、培养条件优化
1. 培养基选择
- 使用含血清或特定生长因子的培养基（如 DMEM、RPMI 1640 等），部分细胞需添加胰岛素、EGF 等。
- 避免频繁更换培养基品牌或批次，减少细胞适应压力。
2. 贴壁与传代
- 原代细胞贴壁能力较弱，可能需要包被培养皿（如胶原蛋白、多聚赖氨酸）。
- 传代时密度建议控制在 70%-80%，过度汇合会导致接触抑制和分化。
三、污染控制
1. 无菌操作
- 全程在超净台操作，使用一次性耗材，避免交叉污染。
- 培养基中可添加双抗，但长期使用可能影响细胞活性。
2. 支原体检测
- 定期检测支原体污染（如 PCR 法），污染后需及时丢弃细胞。
四、状态监控
1. 日常观察
- 每天检查细胞形态、密度及培养基颜色，及时更换培养基（通常每 2-3 天换液一次）。
- 异常形态（如细胞变圆、碎片增多）可能提示污染或营养不足。
2. 传代与冻存
- 原代细胞分裂次数有限（一般 5-10 代），需及时冻存早期代次细胞。
- 冻存液建议使用 DMSO+血清（或专用冻存培养基），梯度降温后液氮保存。
猪骨髓间质干细胞 | 人胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞 |
人鼻粘膜上皮细胞 | 透析袋MD34(7000D) |
人胚胎皮肤细胞 | 透析袋MD44(8000-14000D) |
小鼠心房肌细胞 | 透析袋MD25(8000-14000D) |
人心肌成纤维细胞 | 透析袋MD34(8000-14000D) |
人胚心肌组织来源细胞 | 10-去乙酰紫衫醇 |
大鼠胸主动脉平滑肌细胞 | 硬飞燕草碱 |
KNS-89人脑胶质瘤细胞专用培养基 | 胡黄连苷Ⅲ |
人皮肤基底细胞癌细胞 | 透析袋MD34(3500D) |
小鼠骨髓淋巴细胞 | 拟人参皂苷RT5 |
人急性粒细胞白血病细胞 | 透析袋MD44(3500D) |
人小神经胶质细胞 | Polysaccharide 灵芝多糖 |
永生化食管上皮细胞 | 人腹膜毛细血管内皮细胞橙花叔醇(顺+反) |
人成巨核细胞白血病细胞 | 巴卡亭Ⅲ |
绿色荧光核染料(10000×) | 生物标记的兔抗人IgG |
