A72(胶质母细胞瘤细胞) 具体操作
取出冻存管: 根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。
从液氮罐中取出细胞盒,取出所需的细胞,同时核对管外的编号。
初学者易犯错误:水浴锅未预热或者未预热到37℃。
水浴锅内冻存管太多,导致传热不佳,使融化时间延长。
离心前忘记平衡,导致离心机损坏和细胞丢失。
一次复苏细胞过多,忘记更换吸头和吸管,导致细胞交叉污染。
实验前准备:将水浴锅预热至37℃
A72(胶质母细胞瘤细胞) 用75%酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。
在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶 等。
迅速解冻:
迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻,并要不断的摇动,使管中的液体迅速融化。
.约-2min后
冻存管内液体*溶解,取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁,再拿入超净台内。
平衡离心:用架盘天平平衡后,放入离心机中3000r/min 离心3min
制备细胞悬液:吸弃上清液。
向离心管内加入0ml培养液,吹打制成细胞悬液。
活化与细胞复苏 收到细胞株包裹时, 请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形, 若有请立即通知。细胞株请尽速开始培养, 或立即冷冻保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
细胞复苏的原则-快速融化:必须将冻存在-96℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。
细胞计数:细胞浓度以5×05/ml为宜。
培养细胞将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内2-4小时(或者24-48小时)后换液继续培养培养,换液的时间由细胞情况而定。
公司其他销量大产品信息:每 00ml 培养基中添加 支 70
606 假单胞菌分离琼脂 50g/瓶 用于假单胞菌的检验
607 NAC 琼脂培养基 50g/瓶 用于铜绿假单胞菌的分离培养
608 洋葱假单胞菌琼脂基础(PC)Pseudomonas Cepacia Agar Base 50g/瓶 用于洋葱假单胞菌的分离,每升培 养基中添加过滤除菌的 羟基噻吩 青霉溶液素(00mg)和多粘菌素 B 溶液(300,000units)
609
60
6 含 0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆肉汤(TSB-YE) 50g/瓶 用于李斯特氏菌的培养
63 含 0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂(TSA-YE) 50g/瓶 用于李斯特氏菌纯化
64 李氏增菌肉汤(LB,LB)基础 50g/瓶 用于李斯特氏菌增菌,每 5ml 培养 基中添加 支 40 和 支 40 组成 LB,每 00ml 培养基中添加 支 46 和 支 47 组成 LB
65 PALCAM 琼脂基础 50g/瓶 用 于 李 斯 特 氏 菌 选 择 性 分 离 , 每00ml 培养基中添加 支 403
66 Fraser 肉汤增菌液基础 フレーザー増菌ブイヨン基礎 Fraser Enrichment Broth Base 50g/瓶 用于李斯特氏菌增菌,每 5ml 培养基中添加 407、408、48 各 支组成 Half-Fraser,每 00ml 添加 套支 49、40 组成 Fraser
67 牛津琼脂(OXA)基础 50g/瓶 用 于 李 斯 特 氏 菌 选 择 性 分 离 , 每00ml 培养基中添加 支 409
68 EB 肉汤增菌液基础 50g/瓶 用于李斯特氏菌的选择性增菌,每5ml 培养基中添加 支 40
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