大鼠胸腺淋巴分离自胸腺组织;胸腺是机体的重要淋巴器官,其功能与免疫紧密相关,是T细胞分化、发育、成熟的场所。其还可以分泌胸腺激素及激素类物质,具内分泌机能的器官。位于胸腔前纵隔。胚胎后期及初生时,是一生中重量相对最大的时期。随年龄增长,胸腺继续发育;此后胸腺逐渐退化,淋巴细胞减少,脂肪组织增多。胸腺的结构表面有结缔组织被膜,结缔组织伸入胸腺实质把胸腺分成许多不wan全分隔的小叶。小叶周边为皮质,深部为髓质。皮质不wan全包围髓质,相邻小叶髓质彼此衔接。皮质主要由淋巴细胞和上皮性网状细胞构成,胞质中有颗粒及泡状结构。网状细胞间有密集的淋巴细胞。胸腺的淋巴细胞又称为胸腺细胞,在皮质浅层细胞较大,为较原始的淋巴细胞。中层为中等大小的淋巴细胞,深层为小淋巴细胞。从浅层到深层为造血干细胞增殖分化为小淋巴细胞的过程。皮质内还有巨噬细胞,无淋巴小结。髓质中淋巴细胞少而稀疏,上皮性网状细胞多而显著。形态多样,胞质中有颗粒及泡状结构,为其分泌物,尚有散在的圆形的胸腺小体。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠胸腺淋巴采用机械研磨法结合密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为1×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠胸腺淋巴经过检测,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 大鼠胸腺淋巴细胞 | 组织来源 | 胸腺组织 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 包装 | T25培养瓶 |
货号 | GOY-01X1128 | 细胞形态 | 圆形 |
本公司所有产品仅供科学实验,不做其他科学实验外的使用!
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 悬浮
细胞形态 圆形
传代特性 不增殖;不传代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
准备工作
1. 实验器材准备:准备无菌的培养皿、培养瓶、移液管、离心管、手术器械等,并进行高压灭菌或其他合适的消毒处理。
2. 试剂准备:配制或购买合适的培养基、消化酶(如、胶原酶等)、胎牛血清、双抗等试剂,确保其无菌且在有效期内。
3. 实验动物或组织来源准备:根据实验需求,选择合适的动物并进行相应的麻醉或处死,获取所需组织;或从已有的组织样本库中获取组织。
取材与处理
1. 取材:在无菌条件下,迅速取出目标组织,尽量减少对组织的损伤,并去除多余的脂肪、结缔组织等非目的组织。
2. 清洗:将取出的组织用预冷的无菌PBS冲洗数次,以去除血液和杂质。
3. 剪切:将组织剪成约1 - 2mm³的小块,以便后续消化。
细胞分离
1. 消化:将剪碎的组织块放入含有适量消化酶的离心管中,在37℃恒温摇床或培养箱中消化一段时间。期间可轻轻摇晃离心管,使消化更均匀。
2. 终止消化:当组织块大部分被消化成单细胞悬液或小细胞团时,加入含血清的培养基终止消化。
3. 过滤与离心:用细胞筛过滤细胞悬液,去除未消化的组织碎片,然后将滤液以适当的转速离心,收集细胞沉淀。
细胞观察与检测
1. 日常观察:每天用倒置显微镜观察细胞的形态、生长状态、密度等,记录细胞的变化情况,如发现细胞污染或异常,及时采取相应措施。
2. 细胞计数与活力检测:在需要时,可采用台盼蓝染色等方法对细胞进行计数和活力检测,以了解细胞的生长情况和健康状态。
一、取材与分离
1. 快速操作
- 组织取材后需立即处理,避免长时间暴露于室温或非营养环境。
- 使用无菌 PBS 或生理盐水冲洗组织,去除血液、杂质。
2. 消化酶选择
- 根据组织类型选择消化酶,避免过度消化导致细胞损伤。
- 消化时间需严格控制(通常 10-30 分钟),可通过显微镜观察细胞解离状态。
二、培养条件优化
1. 培养基选择
- 使用含血清或特定生长因子的培养基(如 DMEM、RPMI 1640 等),部分细胞需添加胰岛素、EGF 等。
- 避免频繁更换培养基品牌或批次,减少细胞适应压力。
2. 贴壁与传代
- 原代细胞贴壁能力较弱,可能需要包被培养皿(如胶原蛋白、多聚赖氨酸)。
- 传代时密度建议控制在 70%-80%,过度汇合会导致接触抑制和分化。
三、污染控制
1. 无菌操作
- 全程在超净台操作,使用一次性耗材,避免交叉污染。
- 培养基中可添加双抗,但长期使用可能影响细胞活性。
2. 支原体检测
- 定期检测支原体污染(如 PCR 法),污染后需及时丢弃细胞。
四、状态监控
1. 日常观察
- 每天检查细胞形态、密度及培养基颜色,及时更换培养基(通常每 2-3 天换液一次)。
- 异常形态(如细胞变圆、碎片增多)可能提示污染或营养不足。
2. 传代与冻存
- 原代细胞分裂次数有限(一般 5-10 代),需及时冻存早期代次细胞。
- 冻存液建议使用 DMSO+血清(或专用冻存培养基),梯度降温后液氮保存。
杂交瘤细胞株;8-F3(IgG1) | 杂交瘤细胞株;4G8 |
中国人胰腺癌原位癌细胞系;STL-C1 | 磁力搅拌子B100(棒状,10mm ) |
杂交瘤细胞株;Fm7A11 | 磁力搅拌子B150(棒状,15mm ) |
杂交瘤细胞株;3G8.1 | 磁力搅拌子A200(弧形,20mm ) |
杂交瘤细胞株;Fm6A8 | 磁力搅拌子A100(弧形,10mm) |
杂交瘤细胞株;Fm7E4 | 磁力搅拌子B250(棒状,25mm ) |
杂交瘤细胞株;4G6 | 磁力搅拌子B300(棒状,30mm ) |
人喉癌细胞 TU212(STR鉴定) | 磁力搅拌子B350(棒状,35mm ) |
杂交瘤细胞株;Anti-HBxKY02 | 蓝盖试剂瓶 1000ml |
杂交瘤细胞株;6G1 | 蓝盖试剂瓶 500ml |
杂交瘤细胞株;2C10 | 蓝盖试剂瓶 250ml |
杂交瘤细胞株;4G6 | 蓝盖试剂瓶 100ml |
大鼠骨髓源神经嵴祖细胞;N1 | 大鼠胸腺淋巴细胞蓝盖试剂瓶 50ml |
杂交瘤细胞株;6B5.2 | 1.5ml 样品瓶,蓝盖,开孔,带刻度,棕色(进样瓶) |
5,7-二羟基细胞培养消泡剂 | 1.5ml 样品瓶,蓝盖,开孔,带刻度,透明(进样瓶) |