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产品名称 | 大鼠视乳头星形胶质细胞 | 组织来源 | 眼球 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 包装 | T25培养瓶 |
货号 | GOY-01X1137 | 细胞形态 | 梭形、多角形 |
大鼠视乳头星形胶质分离自视神经乳头;视乳头位于黄斑区鼻侧附近,境界清楚,呈白色、圆盘状,因此也称为视盘。视网膜上视觉纤维在此汇集,并于此穿出眼球向视中枢传递。视乳头中央有一小凹陷区,称为视杯或生理凹陷。视乳头是视神经纤维聚合组成视神经的起始端,它没有视细胞,因而没有视觉,在视野中是生理盲点。视乳头是开角型青光眼最早受损的部位,星形胶质细胞是视神经乳头处主要的胶质细胞类型,可为视网膜神经节细胞无髓鞘的轴突提供结构和生物支持。青光眼视神经变是全球不可逆性致肓眼病。青光眼视神经变以视网膜神经节细胞轴突丧失并伴有视乳头处细胞外基质重坦为主要特征。导致视网膜神经节细胞丧失的病理生理机制尚未wan全阐明,神经胶质细胞对调控神经元微环境起多重作用,越来越多的证据表明胶质细胞町能对神经系统发育、损伤、修复及再生起极为关键的作用。视乳头星形胶质细胞胞体多扁平,体积较大,形状多呈不规则的多边形,突起较粗,胞核为椭圆形,核仁清晰可见,核周有较密集物质,胞质稀疏,骨架结构良好,明显不同于长梭形的成纤维细胞形态。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠视乳头星形胶质采用yi蛋白酶-胶原酶联合消化法、结合差速贴壁制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠视乳头星形胶质经GFAP免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
准备工作
1. 实验器材准备:准备无菌的培养皿、培养瓶、移液管、离心管、手术器械等,并进行高压灭菌或其他合适的消毒处理。
2. 试剂准备:配制或购买合适的培养基、消化酶(如、胶原酶等)、胎牛血清、双抗等试剂,确保其无菌且在有效期内。
3. 实验动物或组织来源准备:根据实验需求,选择合适的动物并进行相应的麻醉或处死,获取所需组织;或从已有的组织样本库中获取组织。
取材与处理
1. 取材:在无菌条件下,迅速取出目标组织,尽量减少对组织的损伤,并去除多余的脂肪、结缔组织等非目的组织。
2. 清洗:将取出的组织用预冷的无菌PBS冲洗数次,以去除血液和杂质。
3. 剪切:将组织剪成约1 - 2mm³的小块,以便后续消化。
细胞分离
1. 消化:将剪碎的组织块放入含有适量消化酶的离心管中,在37℃恒温摇床或培养箱中消化一段时间。期间可轻轻摇晃离心管,使消化更均匀。
2. 终止消化:当组织块大部分被消化成单细胞悬液或小细胞团时,加入含血清的培养基终止消化。
3. 过滤与离心:用细胞筛过滤细胞悬液,去除未消化的组织碎片,然后将滤液以适当的转速离心,收集细胞沉淀。
细胞观察与检测
1. 日常观察:每天用倒置显微镜观察细胞的形态、生长状态、密度等,记录细胞的变化情况,如发现细胞污染或异常,及时采取相应措施。
2. 细胞计数与活力检测:在需要时,可采用台盼蓝染色等方法对细胞进行计数和活力检测,以了解细胞的生长情况和健康状态。
人肝癌细胞;LIXC-501 | 杂交瘤细胞株;4F12 |
杂交瘤细胞株;7B5 | 透析袋夹子 40mm |
杂交瘤细胞株;7F1 | 透析袋夹子 60mm |
杂交瘤细胞株;1C6 | 5ml吸头(适用于金花移液器)国产 |
小鼠骨髓干细胞系;MBMME1 | 透析袋夹子 90mm |
杂交瘤细胞株;DC-C | 无粉乳胶手套 小号 |
小鼠骨髓干细胞系;MBMME2 | 石英比色皿 5mm 7.4×12.4×45mm |
人喉表皮样癌细胞;HEp-2-NS1 | 石英比色皿 10mm 12.4×12.4×45mm |
人成纤维细胞;HF-1 | 即用型透析袋 扁宽24 截留分子量20000 |
人食管鳞癌细胞系;ZEC-127 | 即用型透析袋 扁宽32 截留分子量10000 |
人食管鳞癌细胞系;ZEC-145 | 液闪瓶 10个/包 20ml |
兔正常角膜上皮细胞;RNCEC/HL-032RabbitNormalCornealEpithelialCellsRNCEC/HL-032 | 铝饭盒(22*13*6) |
人食管鳞癌细胞系;ZEC-166 | 大鼠视乳头星形胶质细胞铝饭盒(19*11*6) |
人食管鳞癌细胞系;ZEC-061 | 尼龙筛网 500目 1米 |
4,4'-二甲氧基查耳酮 | 尼龙筛网 400目 1米 |
一、取材与分离
1. 快速操作
- 组织取材后需立即处理,避免长时间暴露于室温或非营养环境。
- 使用无菌 PBS 或生理盐水冲洗组织,去除血液、杂质。
2. 消化酶选择
- 根据组织类型选择消化酶,避免过度消化导致细胞损伤。
- 消化时间需严格控制(通常 10-30 分钟),可通过显微镜观察细胞解离状态。
二、培养条件优化
1. 培养基选择
- 使用含血清或特定生长因子的培养基(如 DMEM、RPMI 1640 等),部分细胞需添加胰岛素、EGF 等。
- 避免频繁更换培养基品牌或批次,减少细胞适应压力。
2. 贴壁与传代
- 原代细胞贴壁能力较弱,可能需要包被培养皿(如胶原蛋白、多聚赖氨酸)。
- 传代时密度建议控制在 70%-80%,过度汇合会导致接触抑制和分化。
三、污染控制
1. 无菌操作
- 全程在超净台操作,使用一次性耗材,避免交叉污染。
- 培养基中可添加双抗,但长期使用可能影响细胞活性。
2. 支原体检测
- 定期检测支原体污染(如 PCR 法),污染后需及时丢弃细胞。
四、状态监控
1. 日常观察
- 每天检查细胞形态、密度及培养基颜色,及时更换培养基(通常每 2-3 天换液一次)。
- 异常形态(如细胞变圆、碎片增多)可能提示污染或营养不足。
2. 传代与冻存
- 原代细胞分裂次数有限(一般 5-10 代),需及时冻存早期代次细胞。
- 冻存液建议使用 DMSO+血清(或专用冻存培养基),梯度降温后液氮保存。