大鼠淋巴结淋巴分离自淋巴结;淋巴结是哺乳类的周围淋巴器官,由淋巴细胞集合而成。呈豆形,位于淋巴管行进途中,是产生免疫应答的重要器官之一。淋巴结表面包有被膜,被膜的结缔组织伸入淋巴结内形成小梁,构成淋巴结的支架。被膜下为皮质区,淋巴结的中心及门部为髓质区。皮质区有淋巴小结、弥散淋巴组织和皮质淋巴窦(简称皮窦),髓质包括由致密淋巴组织构成的髓索和髓质淋巴窦(简称髓窦)。淋巴窦的窦腔内有许多淋巴细胞和巨噬细胞,从输入淋巴管流来的淋巴液入皮窦再流向髓窦,最后经输出淋巴管离开淋巴结。淋巴结的主要功能是滤过淋巴液,产生淋巴细胞和浆细胞,参与机体的免疫反应。淋巴结肿大或疼痛常表示其属区范围内的器官有炎症或其他病变。主要功能是滤过淋巴液,产生淋巴细胞和浆细胞,参与机体的免疫反应;当局部感染时,细菌、病毒或癌细胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴结肿大。如该淋巴结不能阻止和消灭它们,则病变可沿淋巴管的流注方向扩散和转移。淋巴结淋巴细胞是白细胞的一种,由次级淋巴器官淋巴结产生,是机体免疫应答功能的重要细胞成分;细胞为圆形细胞核,细胞质少。成熟淋巴细胞需依赖抗原刺激而分化增殖,继而发挥其免疫功能。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠淋巴结淋巴采用分离淋巴结组织、研磨获取单细胞悬液后通过密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为1×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠淋巴结淋巴经过检测,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 大鼠淋巴结淋巴细胞 | 组织来源 | 淋巴结 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 包装 | T25培养瓶 |
货号 | GOY-01X1206 | 细胞形态 | 圆形 |
本公司所有产品仅供科学实验,不做其他科学实验外的使用!
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 悬浮
细胞形态 圆形
传代特性 不增殖;不传代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
准备工作
1. 实验器材准备:准备无菌的培养皿、培养瓶、移液管、离心管、手术器械等,并进行高压灭菌或其他合适的消毒处理。
2. 试剂准备:配制或购买合适的培养基、消化酶(如、胶原酶等)、胎牛血清、双抗等试剂,确保其无菌且在有效期内。
3. 实验动物或组织来源准备:根据实验需求,选择合适的动物并进行相应的麻醉或处死,获取所需组织;或从已有的组织样本库中获取组织。
取材与处理
1. 取材:在无菌条件下,迅速取出目标组织,尽量减少对组织的损伤,并去除多余的脂肪、结缔组织等非目的组织。
2. 清洗:将取出的组织用预冷的无菌PBS冲洗数次,以去除血液和杂质。
3. 剪切:将组织剪成约1 - 2mm³的小块,以便后续消化。
细胞分离
1. 消化:将剪碎的组织块放入含有适量消化酶的离心管中,在37℃恒温摇床或培养箱中消化一段时间。期间可轻轻摇晃离心管,使消化更均匀。
2. 终止消化:当组织块大部分被消化成单细胞悬液或小细胞团时,加入含血清的培养基终止消化。
3. 过滤与离心:用细胞筛过滤细胞悬液,去除未消化的组织碎片,然后将滤液以适当的转速离心,收集细胞沉淀。
细胞观察与检测
1. 日常观察:每天用倒置显微镜观察细胞的形态、生长状态、密度等,记录细胞的变化情况,如发现细胞污染或异常,及时采取相应措施。
2. 细胞计数与活力检测:在需要时,可采用台盼蓝染色等方法对细胞进行计数和活力检测,以了解细胞的生长情况和健康状态。
一、取材与分离
1. 快速操作
- 组织取材后需立即处理,避免长时间暴露于室温或非营养环境。
- 使用无菌 PBS 或生理盐水冲洗组织,去除血液、杂质。
2. 消化酶选择
- 根据组织类型选择消化酶,避免过度消化导致细胞损伤。
- 消化时间需严格控制(通常 10-30 分钟),可通过显微镜观察细胞解离状态。
二、培养条件优化
1. 培养基选择
- 使用含血清或特定生长因子的培养基(如 DMEM、RPMI 1640 等),部分细胞需添加胰岛素、EGF 等。
- 避免频繁更换培养基品牌或批次,减少细胞适应压力。
2. 贴壁与传代
- 原代细胞贴壁能力较弱,可能需要包被培养皿(如胶原蛋白、多聚赖氨酸)。
- 传代时密度建议控制在 70%-80%,过度汇合会导致接触抑制和分化。
三、污染控制
1. 无菌操作
- 全程在超净台操作,使用一次性耗材,避免交叉污染。
- 培养基中可添加双抗,但长期使用可能影响细胞活性。
2. 支原体检测
- 定期检测支原体污染(如 PCR 法),污染后需及时丢弃细胞。
四、状态监控
1. 日常观察
- 每天检查细胞形态、密度及培养基颜色,及时更换培养基(通常每 2-3 天换液一次)。
- 异常形态(如细胞变圆、碎片增多)可能提示污染或营养不足。
2. 传代与冻存
- 原代细胞分裂次数有限(一般 5-10 代),需及时冻存早期代次细胞。
- 冻存液建议使用 DMSO+血清(或专用冻存培养基),梯度降温后液氮保存。
小鼠杂交瘤细胞;INHA(Inhibin alpha) | 小鼠杂交瘤细胞;Influenza B virus Nucleoprotein |
小鼠杂交瘤细胞;Influenza A virus Nucleoprotein | Krebs-Ringer缓冲液 |
小鼠杂交瘤细胞;IL-8 | 果胶(高酯快凝) |
小鼠淋巴瘤细胞;IL-6 | 偶氮二甲二异丙酯 |
小鼠杂交瘤细胞;IL-16 | 溶剂蓝 38 |
小鼠杂交瘤细胞;IL-11 | 红景天 |
小鼠杂交瘤细胞;IL-10 | MEM NEAA |
人正常乳腺上皮细胞;MCF 10A | 核非变性预制胶 15%,15 wells |
小鼠杂交瘤细胞;IKBKB | 植酶 |
小鼠杂交瘤细胞;HB 11A-A11 | 5'-磷二酯酶(来源橘青霉菌) |
小鼠杂交瘤细胞;HB KC-4 | 异麦芽三糖 98% |
小鼠杂交瘤细胞;HB KC-4G3 | 乙二胺四乙铁钠盐 |
抗鼠CD8单克隆细胞系;YTS 156.7.7 | 大鼠淋巴结淋巴细胞Leptomycin B (0.2mg/ml) 来普霉B(出核转运抑制剂 0.2mg/ml) |
抗鼠CD4单克隆细胞;YTA 3.1.2 | 全反式维A/维甲/视黄 |
葡聚糖T-500 | 乳杆菌肉汤培养基 |