产品名称 | 人外周血白细胞 | 组织来源 | 外周血 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 包装 | T25培养瓶 |
货号 | GOY-01X0801 | 细胞形态 | 圆形 |
人外周血白分离自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。白细胞（Leukocyte），旧称白血球，血液中的一类细胞。根据白细胞的细胞质内有无特殊颗粒，可将其分为有粒白细胞和无粒白细胞。前者常简称为粒细胞，根据其特殊颗粒的染色特性，又分为中性粒细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞，白细胞也通常被称为免疫细胞。在显微镜下可以看到，血细胞中体积比较大、数量比较少，具有细胞核；其主要作用是吞噬细菌、防御疾病。
方法简介：
公司实验室分离的人外周血白采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的人外周血白经过检测，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
本公司所有产品仅供科学实验，不做其他科学实验外的使用！
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 悬浮
细胞形态 圆形
传代特性 不增殖；不传代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
准备工作
1. 实验器材准备：准备无菌的培养皿、培养瓶、移液管、离心管、手术器械等，并进行高压灭菌或其他合适的消毒处理。
2. 试剂准备：配制或购买合适的培养基、消化酶（如、胶原酶等）、胎牛血清、双抗等试剂，确保其无菌且在有效期内。
3. 实验动物或组织来源准备：根据实验需求，选择合适的动物并进行相应的麻醉或处死，获取所需组织；或从已有的组织样本库中获取组织。
取材与处理
1. 取材：在无菌条件下，迅速取出目标组织，尽量减少对组织的损伤，并去除多余的脂肪、结缔组织等非目的组织。
2. 清洗：将取出的组织用预冷的无菌PBS冲洗数次，以去除血液和杂质。
3. 剪切：将组织剪成约1 - 2mm³的小块，以便后续消化。
细胞分离
1. 消化：将剪碎的组织块放入含有适量消化酶的离心管中，在37℃恒温摇床或培养箱中消化一段时间。期间可轻轻摇晃离心管，使消化更均匀。
2. 终止消化：当组织块大部分被消化成单细胞悬液或小细胞团时，加入含血清的培养基终止消化。
3. 过滤与离心：用细胞筛过滤细胞悬液，去除未消化的组织碎片，然后将滤液以适当的转速离心，收集细胞沉淀。
细胞观察与检测
1. 日常观察：每天用倒置显微镜观察细胞的形态、生长状态、密度等，记录细胞的变化情况，如发现细胞污染或异常，及时采取相应措施。
2. 细胞计数与活力检测：在需要时，可采用台盼蓝染色等方法对细胞进行计数和活力检测，以了解细胞的生长情况和健康状态。
一、取材与分离
1. 快速操作
- 组织取材后需立即处理，避免长时间暴露于室温或非营养环境。
- 使用无菌 PBS 或生理盐水冲洗组织，去除血液、杂质。
2. 消化酶选择
- 根据组织类型选择消化酶，避免过度消化导致细胞损伤。
- 消化时间需严格控制（通常 10-30 分钟），可通过显微镜观察细胞解离状态。
二、培养条件优化
1. 培养基选择
- 使用含血清或特定生长因子的培养基（如 DMEM、RPMI 1640 等），部分细胞需添加胰岛素、EGF 等。
- 避免频繁更换培养基品牌或批次，减少细胞适应压力。
2. 贴壁与传代
- 原代细胞贴壁能力较弱，可能需要包被培养皿（如胶原蛋白、多聚赖氨酸）。
- 传代时密度建议控制在 70%-80%，过度汇合会导致接触抑制和分化。
三、污染控制
1. 无菌操作
- 全程在超净台操作，使用一次性耗材，避免交叉污染。
- 培养基中可添加双抗，但长期使用可能影响细胞活性。
2. 支原体检测
- 定期检测支原体污染（如 PCR 法），污染后需及时丢弃细胞。
四、状态监控
1. 日常观察
- 每天检查细胞形态、密度及培养基颜色，及时更换培养基（通常每 2-3 天换液一次）。
- 异常形态（如细胞变圆、碎片增多）可能提示污染或营养不足。
2. 传代与冻存
- 原代细胞分裂次数有限（一般 5-10 代），需及时冻存早期代次细胞。
- 冻存液建议使用 DMSO+血清（或专用冻存培养基），梯度降温后液氮保存。
人低转移肝癌细胞 | 人恶性黑色瘤细胞 |
人尿道上皮细胞 | 384孔板 方型 V型底 PP（聚丙烯）材质 深孔 未灭菌 |
人眼脉络膜黑色瘤细胞 | 96孔板 白色 圆底 PP（聚丙烯）材质 |
小鼠少突胶质前体细胞 | 96孔板，透明，V型底，PP（聚丙烯）材质 |
小鼠气道平滑肌细胞 | 96孔板 黑色 圆底 PP（聚丙烯）材质 |
小鼠脐带间充质干细胞 | 96孔板 白色 圆底 TC表面 带盖 袋装 |
非何杰金氏淋巴瘤细胞 | 96孔板，透明，圆底，PP（聚丙烯）材质，灭菌，袋装 |
人胃癌耐药株 | 96孔板 透明 圆底 TC表面 PS（聚苯乙烯）材质 灭菌 |
小鼠淋巴瘤细胞(NK靶细胞) | 高容量96孔微孔板密封垫 |
人子宫鳞癌细胞（高分化） | 透气密封带 |
TNFa转染耐VP16绒癌细胞 | 96孔板 透明 高容量 V型底 PP（聚丙烯）材质 灭菌 |
人肾透明细胞腺癌细胞 | 96孔板，透明，高容量，V形底，PP（聚丙烯）材质，未灭菌 |
人甲状腺癌细胞KHM-5M（干细胞库保藏） | 人外周血白细胞384孔板 方型 V型底 PP（聚丙烯）材质 深孔 灭菌 |
人膀胱癌细胞（2014年9月新引进）（干细胞库保藏） | 地高的盒子I |
潮霉B（液体） | 氯化锂 |
