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产品名称 | 大鼠口腔上皮细胞 | 组织来源 | 口腔黏膜组织 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 包装 | T25培养瓶 |
货号 | GOY-01X1356 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
大鼠口腔上皮分离自口腔黏膜组织；口腔上皮细胞是一种上皮细胞，呈扁平、多边形，形状不规则。口腔各壁都有黏膜覆盖，口腔上皮细胞主要分布在口腔两侧颊部。上皮的垂直切面上，细胞形状不一。紧靠基膜的一层基底细胞为矮柱状，为具有增殖分化能力的干细胞，部分子细胞向浅层移动。基底层以上是数层多边形细胞，再上为几层梭形或扁平细胞。仅靠近表面几层细胞为扁平状，基底层细胞能不断分裂增生，以补充表层衰老或损伤脱落的细胞。复层扁平上皮深层的结缔组织内有丰富的毛细血管，有利于复层扁平上皮的营养。
方法简介：
公司实验室分离的大鼠口腔上皮先中性dan白酶消化、后yi蛋白酶-胶原酶混合消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的大鼠口腔上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
准备工作
1. 实验器材准备：准备无菌的培养皿、培养瓶、移液管、离心管、手术器械等，并进行高压灭菌或其他合适的消毒处理。
2. 试剂准备：配制或购买合适的培养基、消化酶（如、胶原酶等）、胎牛血清、双抗等试剂，确保其无菌且在有效期内。
3. 实验动物或组织来源准备：根据实验需求，选择合适的动物并进行相应的麻醉或处死，获取所需组织；或从已有的组织样本库中获取组织。
取材与处理
1. 取材：在无菌条件下，迅速取出目标组织，尽量减少对组织的损伤，并去除多余的脂肪、结缔组织等非目的组织。
2. 清洗：将取出的组织用预冷的无菌PBS冲洗数次，以去除血液和杂质。
3. 剪切：将组织剪成约1 - 2mm³的小块，以便后续消化。
细胞分离
1. 消化：将剪碎的组织块放入含有适量消化酶的离心管中，在37℃恒温摇床或培养箱中消化一段时间。期间可轻轻摇晃离心管，使消化更均匀。
2. 终止消化：当组织块大部分被消化成单细胞悬液或小细胞团时，加入含血清的培养基终止消化。
3. 过滤与离心：用细胞筛过滤细胞悬液，去除未消化的组织碎片，然后将滤液以适当的转速离心，收集细胞沉淀。
细胞观察与检测
1. 日常观察：每天用倒置显微镜观察细胞的形态、生长状态、密度等，记录细胞的变化情况，如发现细胞污染或异常，及时采取相应措施。
2. 细胞计数与活力检测：在需要时，可采用台盼蓝染色等方法对细胞进行计数和活力检测，以了解细胞的生长情况和健康状态。
人脐动脉内皮细胞，HUAECP细胞 | 人脐动脉平滑肌细胞，HUASMCP细胞 |
人脐静脉内皮细胞，HUVECP细胞 | 酒石罗格列 |
人脐静脉平滑肌细胞，HUVSMCP细胞 | 依西美中间体（雄甾-4-烯-3，17-二酮） |
人前列腺成纤维细胞，HPFTR细胞 | 培美曲二钠 |
人前列腺上皮细胞，HPECGD细胞 | 1-(2,3,4--三甲氧苯甲基)二盐盐 |
人前脂肪细胞，HPTR细胞 | 培美曲二钠D-异构体 |
人韧带成纤维细胞 | 甲磺齐拉西酮 |
垂体瘤细胞 | 乌拉地杂质A |
人乳腺导管上皮细胞 | 盐吡格列杂质（5-｛4-［2-（5-乙基-2-吡啶基）乙氧基］苯基亚甲基｝-2，4-噻唑二酮) |
人乳腺上皮细胞，HMECGD细胞 | 异甘草镁 |
人肾成纤维细胞 | 左佐匹克 |
人肾小管上皮细胞，HRPTEC细胞 | C含量检测试剂盒 |
人肾小球内皮细胞，HRGEC细胞 | 大鼠口腔上皮细胞右旋盐罗哌卡 |
人肾小球系膜细胞，HRMCC细胞 | 罗哌卡盐盐 |
96孔0.25mm孔径玻璃纤维膜过滤板，未灭菌 | OlmesartanMedoxomil |
一、取材与分离
1. 快速操作
- 组织取材后需立即处理，避免长时间暴露于室温或非营养环境。
- 使用无菌 PBS 或生理盐水冲洗组织，去除血液、杂质。
2. 消化酶选择
- 根据组织类型选择消化酶，避免过度消化导致细胞损伤。
- 消化时间需严格控制（通常 10-30 分钟），可通过显微镜观察细胞解离状态。
二、培养条件优化
1. 培养基选择
- 使用含血清或特定生长因子的培养基（如 DMEM、RPMI 1640 等），部分细胞需添加胰岛素、EGF 等。
- 避免频繁更换培养基品牌或批次，减少细胞适应压力。
2. 贴壁与传代
- 原代细胞贴壁能力较弱，可能需要包被培养皿（如胶原蛋白、多聚赖氨酸）。
- 传代时密度建议控制在 70%-80%，过度汇合会导致接触抑制和分化。
三、污染控制
1. 无菌操作
- 全程在超净台操作，使用一次性耗材，避免交叉污染。
- 培养基中可添加双抗，但长期使用可能影响细胞活性。
2. 支原体检测
- 定期检测支原体污染（如 PCR 法），污染后需及时丢弃细胞。
四、状态监控
1. 日常观察
- 每天检查细胞形态、密度及培养基颜色，及时更换培养基（通常每 2-3 天换液一次）。
- 异常形态（如细胞变圆、碎片增多）可能提示污染或营养不足。
2. 传代与冻存
- 原代细胞分裂次数有限（一般 5-10 代），需及时冻存早期代次细胞。
- 冻存液建议使用 DMSO+血清（或专用冻存培养基），梯度降温后液氮保存。
