产品名称 | 大鼠下丘脑神经元细胞 | 组织来源 | 脑组织 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 包装 | T25培养瓶 |
货号 | GOY-01X1374 | 细胞形态 | 神经元细胞样 |
大鼠下丘脑神经元分离自下丘脑；下丘脑又称丘脑下部，位于大脑腹面、丘脑的下方，是调节内脏活动和内分泌活动的较高级神经中枢所在。下丘脑自前向后可分三部﹐即前部（又名视前区和视上区）﹑中部（结节区）和后部（乳头体区）。下丘脑具有许多细胞核团和纤维束﹐与中枢神经系统的其它部位具有密切的相互联系。它不仅通过神经和血管途径调节脑垂体前﹑后叶激素的分泌和释放﹐而且还参与调节自主神经系统﹐如控制水盐代谢﹑调节体温﹑摄食﹑睡眠﹑生殖、内脏活动以及情绪等。下丘脑神经元与来自其他部位的神经纤维有广泛的突触联系，可以接受很多神经冲动，为内分泌系统和神经系统的中心。它们能调节垂体前叶功能，合成神经垂体激素及控制自主神经和植物神经功能。故提取下丘脑神经元进行体外培养，建立下丘脑神经元体外实验平台具有重要意义。
方法简介：
公司实验室分离的大鼠下丘脑神经元采用yi蛋白酶消化法结合神经元专用培养基培养、化学试剂抑制法筛选制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的大鼠下丘脑神经元经β-Tubulin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
本公司所有产品仅供科学实验，不做其他科学实验外的使用！
包被条件 PLL（0.1mg/ml）
培养基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 神经元细胞样
传代特性 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群
消化液 0.25%yi蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
准备工作
1. 实验器材准备：准备无菌的培养皿、培养瓶、移液管、离心管、手术器械等，并进行高压灭菌或其他合适的消毒处理。
2. 试剂准备：配制或购买合适的培养基、消化酶（如、胶原酶等）、胎牛血清、双抗等试剂，确保其无菌且在有效期内。
3. 实验动物或组织来源准备：根据实验需求，选择合适的动物并进行相应的麻醉或处死，获取所需组织；或从已有的组织样本库中获取组织。
取材与处理
1. 取材：在无菌条件下，迅速取出目标组织，尽量减少对组织的损伤，并去除多余的脂肪、结缔组织等非目的组织。
2. 清洗：将取出的组织用预冷的无菌PBS冲洗数次，以去除血液和杂质。
3. 剪切：将组织剪成约1 - 2mm³的小块，以便后续消化。
细胞分离
1. 消化：将剪碎的组织块放入含有适量消化酶的离心管中，在37℃恒温摇床或培养箱中消化一段时间。期间可轻轻摇晃离心管，使消化更均匀。
2. 终止消化：当组织块大部分被消化成单细胞悬液或小细胞团时，加入含血清的培养基终止消化。
3. 过滤与离心：用细胞筛过滤细胞悬液，去除未消化的组织碎片，然后将滤液以适当的转速离心，收集细胞沉淀。
细胞观察与检测
1. 日常观察：每天用倒置显微镜观察细胞的形态、生长状态、密度等，记录细胞的变化情况，如发现细胞污染或异常，及时采取相应措施。
2. 细胞计数与活力检测：在需要时，可采用台盼蓝染色等方法对细胞进行计数和活力检测，以了解细胞的生长情况和健康状态。
一、取材与分离
1. 快速操作
- 组织取材后需立即处理，避免长时间暴露于室温或非营养环境。
- 使用无菌 PBS 或生理盐水冲洗组织，去除血液、杂质。
2. 消化酶选择
- 根据组织类型选择消化酶，避免过度消化导致细胞损伤。
- 消化时间需严格控制（通常 10-30 分钟），可通过显微镜观察细胞解离状态。
二、培养条件优化
1. 培养基选择
- 使用含血清或特定生长因子的培养基（如 DMEM、RPMI 1640 等），部分细胞需添加胰岛素、EGF 等。
- 避免频繁更换培养基品牌或批次，减少细胞适应压力。
2. 贴壁与传代
- 原代细胞贴壁能力较弱，可能需要包被培养皿（如胶原蛋白、多聚赖氨酸）。
- 传代时密度建议控制在 70%-80%，过度汇合会导致接触抑制和分化。
三、污染控制
1. 无菌操作
- 全程在超净台操作，使用一次性耗材，避免交叉污染。
- 培养基中可添加双抗，但长期使用可能影响细胞活性。
2. 支原体检测
- 定期检测支原体污染（如 PCR 法），污染后需及时丢弃细胞。
四、状态监控
1. 日常观察
- 每天检查细胞形态、密度及培养基颜色，及时更换培养基（通常每 2-3 天换液一次）。
- 异常形态（如细胞变圆、碎片增多）可能提示污染或营养不足。
2. 传代与冻存
- 原代细胞分裂次数有限（一般 5-10 代），需及时冻存早期代次细胞。
- 冻存液建议使用 DMSO+血清（或专用冻存培养基），梯度降温后液氮保存。
小鼠成肌细胞；C2C12 | 人结直肠腺癌细胞；Caco-2 |
人宫颈癌上皮细胞；CaSki[CaSki] | 尼索地杂质Ⅱ |
人髓母细胞瘤细胞；D341Med | 华法钠 |
人结直肠腺癌细胞；HCT-8[HRT-18] | 来米特杂质Ⅱ |
人子宫内膜腺癌细胞；HEC-1-B[HEC-1B;HEC1B] | 来米特杂质I（4-三氟甲基胺） |
小鼠肝癌细胞；Hepa1-6[Hepa1-6] | 杆菌 供HPLC含量测定用 |
人乳腺癌细胞；SK-BR-3 | N-(4-氯苯甲酰基)-酪胺 |
大鼠卵巢颗粒细胞 | 2,6-二甲基-4-(2,3-二氯基)-3,5-吡啶二甲甲酯乙酯（非洛地杂质Ⅰ） |
猪肾细胞；LLC-PK1 | 尼索地杂质I（2，6-二甲基-4-（2-硝基苯基）-3，5-吡啶二羧甲甲酯异丁酯） |
大鼠小肠隐窝上皮细胞；IEC-6 | 2，6-二甲基-4-（3-硝基苯基）-3,5-吡啶二甲-2-甲氧乙酯异丙酯（尼莫地杂质I） |
人胚皮肤成纤维细胞；CCC-ESF-1 | Befetupitant |
人结直肠腺癌细胞；HT-29 | BD-AcAc 2 |
人巨细胞白血病细胞株；Mo7e | 大鼠下丘脑神经元细胞BD 1008 dihydrobromide |
人非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H157 | 二氧苄啶 |
尿苷-5'-二磷钠 | 丙戊镁 |
