大鼠阴茎白膜成纤维分离自阴茎白膜组织；海绵体，又称海绵体肌，是最硬的平滑肌和结缔组织。海绵体是一种勃起组织，外面包有坚厚的白膜，内部由结缔组织和平滑肌组成海绵状支架，其腔隙与血管相通。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的阴茎白膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁wan全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。阴茎白膜成纤维细胞（PLFs）作为牙周膜的主体细胞，是牙周膜主要的间质细胞，它不仅具有合成胶原、基质、弹力纤维和糖蛋白的功能，还有吸收胶原吞噬异物的能力，还参与了牙周组织的病变、修复及再生过程。现在，利用牙周膜细胞建立体外模型，已经成为有关员研究牙周组织疾病的重要手段。
产品名称 | 大鼠阴茎白膜成纤维细胞 | 组织来源 | 阴茎白膜组织 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 包装 | T25培养瓶 |
货号 | GOY-01X1413 | 细胞形态 |
本公司所有产品仅供科学实验，不做其他科学实验外的使用！
DMEM[H]、FBS、成纤维细胞生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
准备工作
1. 实验器材准备：准备无菌的培养皿、培养瓶、移液管、离心管、手术器械等，并进行高压灭菌或其他合适的消毒处理。
2. 试剂准备：配制或购买合适的培养基、消化酶（如、胶原酶等）、胎牛血清、双抗等试剂，确保其无菌且在有效期内。
3. 实验动物或组织来源准备：根据实验需求，选择合适的动物并进行相应的麻醉或处死，获取所需组织；或从已有的组织样本库中获取组织。
取材与处理
1. 取材：在无菌条件下，迅速取出目标组织，尽量减少对组织的损伤，并去除多余的脂肪、结缔组织等非目的组织。
2. 清洗：将取出的组织用预冷的无菌PBS冲洗数次，以去除血液和杂质。
3. 剪切：将组织剪成约1 - 2mm³的小块，以便后续消化。
细胞分离
1. 消化：将剪碎的组织块放入含有适量消化酶的离心管中，在37℃恒温摇床或培养箱中消化一段时间。期间可轻轻摇晃离心管，使消化更均匀。
2. 终止消化：当组织块大部分被消化成单细胞悬液或小细胞团时，加入含血清的培养基终止消化。
3. 过滤与离心：用细胞筛过滤细胞悬液，去除未消化的组织碎片，然后将滤液以适当的转速离心，收集细胞沉淀。
细胞观察与检测
1. 日常观察：每天用倒置显微镜观察细胞的形态、生长状态、密度等，记录细胞的变化情况，如发现细胞污染或异常，及时采取相应措施。
2. 细胞计数与活力检测：在需要时，可采用台盼蓝染色等方法对细胞进行计数和活力检测，以了解细胞的生长情况和健康状态。
一、取材与分离
1. 快速操作
- 组织取材后需立即处理，避免长时间暴露于室温或非营养环境。
- 使用无菌 PBS 或生理盐水冲洗组织，去除血液、杂质。
2. 消化酶选择
- 根据组织类型选择消化酶，避免过度消化导致细胞损伤。
- 消化时间需严格控制（通常 10-30 分钟），可通过显微镜观察细胞解离状态。
二、培养条件优化
1. 培养基选择
- 使用含血清或特定生长因子的培养基（如 DMEM、RPMI 1640 等），部分细胞需添加胰岛素、EGF 等。
- 避免频繁更换培养基品牌或批次，减少细胞适应压力。
2. 贴壁与传代
- 原代细胞贴壁能力较弱，可能需要包被培养皿（如胶原蛋白、多聚赖氨酸）。
- 传代时密度建议控制在 70%-80%，过度汇合会导致接触抑制和分化。
三、污染控制
1. 无菌操作
- 全程在超净台操作，使用一次性耗材，避免交叉污染。
- 培养基中可添加双抗，但长期使用可能影响细胞活性。
2. 支原体检测
- 定期检测支原体污染（如 PCR 法），污染后需及时丢弃细胞。
四、状态监控
1. 日常观察
- 每天检查细胞形态、密度及培养基颜色，及时更换培养基（通常每 2-3 天换液一次）。
- 异常形态（如细胞变圆、碎片增多）可能提示污染或营养不足。
2. 传代与冻存
- 原代细胞分裂次数有限（一般 5-10 代），需及时冻存早期代次细胞。
- 冻存液建议使用 DMSO+血清（或专用冻存培养基），梯度降温后液氮保存。
二氢还原缺陷型中国仓鼠卵巢细胞；CHO/dhFr- | 中国仓鼠卵巢细胞；CHO |
叙利亚仓鼠肾细胞；BHK-21 | FITC标记的小鼠抗猪IgG单克隆抗体 |
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆)；CHO-K1 | 辣根过氧化物酶标记的小鼠抗猪IgG单克隆抗体 |
仓鼠卵巢细胞；Lec1 | 生物标记的小鼠抗猪IgG单克隆抗体 |
中国仓鼠肺细胞；V79 | 罗丹明标记的小鼠抗猪IgG单克隆抗体 |
人胚肾细胞；293[HEK-293] | SAlexa Fluor 350标记的小鼠抗兔IgG单克隆抗体 |
人EB病毒转化的B细胞；CGM1 | SAlexa Fluor 488标记的小鼠抗兔IgG单克隆抗体 |
大鼠输卵管上皮细胞 | SAlexa Fluor 555标记的小鼠抗兔IgG单克隆抗体 |
人胚肺成纤维细胞；WI-38[WI38] | Cy7标记的小鼠抗猪IgG单克隆抗体 |
人肝细胞；QSG-7701[QSG7701] | Cy5标记的小鼠抗猪IgG单克隆抗体 |
人胚肺成纤维细胞；HFL-I | Cy5.5标记的小鼠抗猪IgG单克隆抗体 |
人肝细胞；HL-7702[L-02] | Cy3.5标记的小鼠抗猪IgG单克隆抗体 |
人张氏肝细胞；Changliver | 大鼠阴茎白膜成纤维细胞Cy3标记的小鼠抗猪IgG单克隆抗体 |
人羊膜细胞；WISH | SAlexa Fluor 647标记的小鼠抗猪IgG单克隆抗体 |
抹刀，带平头/勺，无菌 | SAlexa Fluor 555标记的小鼠抗猪IgG单克隆抗体 |
