大鼠骨髓单个核分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓单个核细胞是骨髓中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞和单核细胞。注意这里是（mononuclear cell）单个核细胞，而不是（Monocyte）单核细胞。单个核细胞的体积、形态和比重与骨髓其他细胞不同，利用一定比例聚蔗糖和泛影钠形成的等渗溶液作密度梯度离心，使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，可将各种血细胞与单个核分离。
方法简介：
公司实验室分离的大鼠骨髓单个核采用取骨髓、通过密度梯度离心法制备而来制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的大鼠骨髓单个核经过检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 大鼠骨髓单个核细胞 | 组织来源 | 骨髓 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 包装 | T25培养瓶 |
货号 | GOY-01X1423 | 细胞形态 | 圆形 |
本公司所有产品仅供科学实验，不做其他科学实验外的使用！
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 半贴壁半悬浮
细胞形态 圆形
传代特性 不增殖；不传代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
准备工作
1. 实验器材准备：准备无菌的培养皿、培养瓶、移液管、离心管、手术器械等，并进行高压灭菌或其他合适的消毒处理。
2. 试剂准备：配制或购买合适的培养基、消化酶（如、胶原酶等）、胎牛血清、双抗等试剂，确保其无菌且在有效期内。
3. 实验动物或组织来源准备：根据实验需求，选择合适的动物并进行相应的麻醉或处死，获取所需组织；或从已有的组织样本库中获取组织。
取材与处理
1. 取材：在无菌条件下，迅速取出目标组织，尽量减少对组织的损伤，并去除多余的脂肪、结缔组织等非目的组织。
2. 清洗：将取出的组织用预冷的无菌PBS冲洗数次，以去除血液和杂质。
3. 剪切：将组织剪成约1 - 2mm³的小块，以便后续消化。
细胞分离
1. 消化：将剪碎的组织块放入含有适量消化酶的离心管中，在37℃恒温摇床或培养箱中消化一段时间。期间可轻轻摇晃离心管，使消化更均匀。
2. 终止消化：当组织块大部分被消化成单细胞悬液或小细胞团时，加入含血清的培养基终止消化。
3. 过滤与离心：用细胞筛过滤细胞悬液，去除未消化的组织碎片，然后将滤液以适当的转速离心，收集细胞沉淀。
细胞观察与检测
1. 日常观察：每天用倒置显微镜观察细胞的形态、生长状态、密度等，记录细胞的变化情况，如发现细胞污染或异常，及时采取相应措施。
2. 细胞计数与活力检测：在需要时，可采用台盼蓝染色等方法对细胞进行计数和活力检测，以了解细胞的生长情况和健康状态。
一、取材与分离
1. 快速操作
- 组织取材后需立即处理，避免长时间暴露于室温或非营养环境。
- 使用无菌 PBS 或生理盐水冲洗组织，去除血液、杂质。
2. 消化酶选择
- 根据组织类型选择消化酶，避免过度消化导致细胞损伤。
- 消化时间需严格控制（通常 10-30 分钟），可通过显微镜观察细胞解离状态。
二、培养条件优化
1. 培养基选择
- 使用含血清或特定生长因子的培养基（如 DMEM、RPMI 1640 等），部分细胞需添加胰岛素、EGF 等。
- 避免频繁更换培养基品牌或批次，减少细胞适应压力。
2. 贴壁与传代
- 原代细胞贴壁能力较弱，可能需要包被培养皿（如胶原蛋白、多聚赖氨酸）。
- 传代时密度建议控制在 70%-80%，过度汇合会导致接触抑制和分化。
三、污染控制
1. 无菌操作
- 全程在超净台操作，使用一次性耗材，避免交叉污染。
- 培养基中可添加双抗，但长期使用可能影响细胞活性。
2. 支原体检测
- 定期检测支原体污染（如 PCR 法），污染后需及时丢弃细胞。
四、状态监控
1. 日常观察
- 每天检查细胞形态、密度及培养基颜色，及时更换培养基（通常每 2-3 天换液一次）。
- 异常形态（如细胞变圆、碎片增多）可能提示污染或营养不足。
2. 传代与冻存
- 原代细胞分裂次数有限（一般 5-10 代），需及时冻存早期代次细胞。
- 冻存液建议使用 DMSO+血清（或专用冻存培养基），梯度降温后液氮保存。
人肺腺癌细胞；Calu-3 | 人肝癌细胞；BEL-7405 |
人结直肠腺癌细胞；Caco-2 | Mouse Anti-Human IgG(5C7)/Cy5 |
人盲肠腺癌细胞（未分化）；Hce-8693[HCE8693] | Cy5标记的牛血清白蛋白 100ul |
人食管癌细胞；Eca-109[Eca109] | 储液瓶， 250mL Square PET Storage Bottles with 45mm Caps |
人红白细胞白血病细胞；HEL | 猪血清 |
人肝癌细胞；HepG2[HepG2] | 针头滤器, 26mm直径, 0.2um孔径, PES(聚醚砜)膜, LL/LS, 灭菌, |
人乳腺癌细胞；MCF7 | 针头滤器 50mm直径 0.2um孔径PTFE（聚四氟乙烯）膜 HB/HB(软管扣/软管扣） 灭菌 |
大鼠主动脉血管平滑肌细胞 | 针头滤器 25mm直径 0.45um孔径 NY（尼龙）膜 LL/LS(注射器母口/注射器公口） 灭菌 |
人膀胱鳞癌细胞；SCaBER | Mouse Anti-Human IgG(5C7)/Cy3.5 |
人口腔表皮样癌细胞；KB | Mouse Anti-Human IgG(5C7)/SAlexa Fluor 647 |
人舌鳞癌细胞；Tca-8113[Tca8113] | Mouse Anti-Human IgG(5C7)/SAlexa Fluor 488 |
人皮肤鳞癌细胞；A-431[A431] | Cy5.5标记的链霉亲和 |
人髓样甲状腺肿瘤细胞；TT | 大鼠骨髓单个核细胞Cy5标记的链霉亲和 |
人前列腺癌细胞；DU145[DU145；DU-145] | Cy5标记的兔抗牛IgG |
细粒透镜96方井存储块垫，非无菌 | SAlexa Fluor 647标记的链霉亲和 |
