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产品名称 | 大鼠阴道壁成纤维细胞 | 组织来源 | 阴道组织 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 包装 | T25培养瓶 |
货号 | GOY-01X1426 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
大鼠阴道壁成纤维分离自阴道组织；阴道位于膀胱、尿道和直肠之间，是一个富有弹性的管状器官。它在人类生殖过程中具有多种生理功能，是连接子宫与外阴的通道，是排出月经血、娩出婴儿的必经之路，也是一个重要的性交器官。阴道壁按组织学由外到内分三层，即黏膜层、肌层和外膜。1）黏膜层由上皮和固有膜组成。上皮较厚，为复层鳞状上皮，从基底层到表层由基底层、旁基底层、中间层和表层组成。没有角化层。阴道粘膜的基底层呈细波纹状起伏。2）肌层由平滑肌组织构成，肌束排列不规则，纵行和环形互相交错。肌束间有较多的结缔组织和弹性纤维。阴道外口有环形的横纹肌称括约肌。3）外膜层为纤维膜，由结缔组织构成，内含丰富的弹性纤维、静脉丛、淋巴管和神经。大鼠阴道壁成纤维主要分离自外膜层，成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。
方法简介：
公司实验室分离的大鼠阴道壁成纤维采用yi蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的大鼠阴道壁成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3-5代左右；3代以内状态
消化液 0.25%yi蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
准备工作
1. 实验器材准备：准备无菌的培养皿、培养瓶、移液管、离心管、手术器械等，并进行高压灭菌或其他合适的消毒处理。
2. 试剂准备：配制或购买合适的培养基、消化酶（如、胶原酶等）、胎牛血清、双抗等试剂，确保其无菌且在有效期内。
3. 实验动物或组织来源准备：根据实验需求，选择合适的动物并进行相应的麻醉或处死，获取所需组织；或从已有的组织样本库中获取组织。
取材与处理
1. 取材：在无菌条件下，迅速取出目标组织，尽量减少对组织的损伤，并去除多余的脂肪、结缔组织等非目的组织。
2. 清洗：将取出的组织用预冷的无菌PBS冲洗数次，以去除血液和杂质。
3. 剪切：将组织剪成约1 - 2mm³的小块，以便后续消化。
细胞分离
1. 消化：将剪碎的组织块放入含有适量消化酶的离心管中，在37℃恒温摇床或培养箱中消化一段时间。期间可轻轻摇晃离心管，使消化更均匀。
2. 终止消化：当组织块大部分被消化成单细胞悬液或小细胞团时，加入含血清的培养基终止消化。
3. 过滤与离心：用细胞筛过滤细胞悬液，去除未消化的组织碎片，然后将滤液以适当的转速离心，收集细胞沉淀。
细胞观察与检测
1. 日常观察：每天用倒置显微镜观察细胞的形态、生长状态、密度等，记录细胞的变化情况，如发现细胞污染或异常，及时采取相应措施。
2. 细胞计数与活力检测：在需要时，可采用台盼蓝染色等方法对细胞进行计数和活力检测，以了解细胞的生长情况和健康状态。
小鼠睾丸间质细胞瘤细胞；MLTC-1 | 小鼠前列腺癌细胞；RM-1 |
小鼠腹水瘤细胞；S-180 | 滚瓶 1700cm2 易握盖,PS（聚苯乙烯）材质 有刻度 灭菌 袋装(430852/430853/431134/431191) |
小鼠腹水瘤细胞；SAC-Ⅱb2 | 滚瓶，1700cm2，CellBIND表面，易握盖，PS（聚苯乙烯）材质，有刻度，灭菌，袋装 |
小鼠骨髓瘤细胞；Sp2/0-Ag14 | 滚瓶盖 48mm直径 易握透气盖 灭菌 |
小鼠淋巴瘤细胞；EL4.IL-2 | 滚瓶 850cm2 易握盖,PS（聚苯乙烯）材质 有刻度 灭菌 袋装 有刻度 |
小鼠前胃癌细胞；MFC | 冻存管管架，PP（聚丙烯）材质，未灭菌，袋装 |
小鼠骨髓瘤细胞；P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1] | 离心管支持衬垫，500ml PEI（聚醚酰亚胺）材质,，未灭菌 |
非洲绿猴肾细胞 | 离心管，500ml PP（聚丙烯）材质,密封盖，灭菌 |
小鼠淋巴细胞白血病；L1210 | 三角培养瓶，125ml，26mm颈瓶直径，透气盖，PC（聚碳酯）材质，灭菌 |
小鼠睾丸畸胎瘤细胞；P19 | 三角培养瓶，250ml，31mm颈瓶直径，透气盖，PC（聚碳酯）材质，灭菌 |
小鼠乳腺肿瘤细胞；C127[C-127] | 三角培养瓶，500ml，43mm颈瓶直径，透气盖，PC材质，灭菌单独包装 |
小鼠淋巴瘤细胞(NK靶细胞)；YAC-1 | 三角培养瓶，1000ml，43mm颈瓶直径，密封盖盖，PC（聚碳酯）材质，灭菌单独包装 |
小鼠肝癌细胞；Hepa1-6[Hepa1-6] | 大鼠阴道壁成纤维细胞三角培养瓶，1000ml，43mm颈瓶直径，透气盖，PC（聚碳酯）材质，灭菌单独包装 |
小鼠神经母细胞瘤细胞；Neuro-2a[N2a;Neuro-2a] | 真空过滤系统，150ml，0.22um，PES（聚醚砜）膜，50mm直径，灭菌 |
聚苯乙烯通用微孔板盖角缺口，无菌 | 真空过滤系统 150ml 0.22umCA(醋纤维）膜 50mm直径 灭菌9(cf 430516) |
一、取材与分离
1. 快速操作
- 组织取材后需立即处理，避免长时间暴露于室温或非营养环境。
- 使用无菌 PBS 或生理盐水冲洗组织，去除血液、杂质。
2. 消化酶选择
- 根据组织类型选择消化酶，避免过度消化导致细胞损伤。
- 消化时间需严格控制（通常 10-30 分钟），可通过显微镜观察细胞解离状态。
二、培养条件优化
1. 培养基选择
- 使用含血清或特定生长因子的培养基（如 DMEM、RPMI 1640 等），部分细胞需添加胰岛素、EGF 等。
- 避免频繁更换培养基品牌或批次，减少细胞适应压力。
2. 贴壁与传代
- 原代细胞贴壁能力较弱，可能需要包被培养皿（如胶原蛋白、多聚赖氨酸）。
- 传代时密度建议控制在 70%-80%，过度汇合会导致接触抑制和分化。
三、污染控制
1. 无菌操作
- 全程在超净台操作，使用一次性耗材，避免交叉污染。
- 培养基中可添加双抗，但长期使用可能影响细胞活性。
2. 支原体检测
- 定期检测支原体污染（如 PCR 法），污染后需及时丢弃细胞。
四、状态监控
1. 日常观察
- 每天检查细胞形态、密度及培养基颜色，及时更换培养基（通常每 2-3 天换液一次）。
- 异常形态（如细胞变圆、碎片增多）可能提示污染或营养不足。
2. 传代与冻存
- 原代细胞分裂次数有限（一般 5-10 代），需及时冻存早期代次细胞。
- 冻存液建议使用 DMSO+血清（或专用冻存培养基），梯度降温后液氮保存。
