本公司所有产品仅供科学实验,不做其他科学实验外的使用!
产品名称 | 小鼠口腔上皮细胞 | 组织来源 | 口腔黏膜组织 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 包装 | T25培养瓶 |
货号 | GOY-01X1355 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
小鼠口腔上皮分离自口腔黏膜组织;口腔上皮细胞是一种上皮细胞,呈扁平、多边形,形状不规则。口腔各壁都有黏膜覆盖,口腔上皮细胞主要分布在口腔两侧颊部。上皮的垂直切面上,细胞形状不一。紧靠基膜的一层基底细胞为矮柱状,为具有增殖分化能力的干细胞,部分子细胞向浅层移动。基底层以上是数层多边形细胞,再上为几层梭形或扁平细胞。仅靠近表面几层细胞为扁平状,基底层细胞能不断分裂增生,以补充表层衰老或损伤脱落的细胞。复层扁平上皮深层的结缔组织内有丰富的毛细血管,有利于复层扁平上皮的营养。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠口腔上皮先中性dan白酶消化、后yi蛋白酶-胶原酶混合消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠口腔上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
准备工作
1. 实验器材准备:准备无菌的培养皿、培养瓶、移液管、离心管、手术器械等,并进行高压灭菌或其他合适的消毒处理。
2. 试剂准备:配制或购买合适的培养基、消化酶(如、胶原酶等)、胎牛血清、双抗等试剂,确保其无菌且在有效期内。
3. 实验动物或组织来源准备:根据实验需求,选择合适的动物并进行相应的麻醉或处死,获取所需组织;或从已有的组织样本库中获取组织。
取材与处理
1. 取材:在无菌条件下,迅速取出目标组织,尽量减少对组织的损伤,并去除多余的脂肪、结缔组织等非目的组织。
2. 清洗:将取出的组织用预冷的无菌PBS冲洗数次,以去除血液和杂质。
3. 剪切:将组织剪成约1 - 2mm³的小块,以便后续消化。
细胞分离
1. 消化:将剪碎的组织块放入含有适量消化酶的离心管中,在37℃恒温摇床或培养箱中消化一段时间。期间可轻轻摇晃离心管,使消化更均匀。
2. 终止消化:当组织块大部分被消化成单细胞悬液或小细胞团时,加入含血清的培养基终止消化。
3. 过滤与离心:用细胞筛过滤细胞悬液,去除未消化的组织碎片,然后将滤液以适当的转速离心,收集细胞沉淀。
细胞观察与检测
1. 日常观察:每天用倒置显微镜观察细胞的形态、生长状态、密度等,记录细胞的变化情况,如发现细胞污染或异常,及时采取相应措施。
2. 细胞计数与活力检测:在需要时,可采用台盼蓝染色等方法对细胞进行计数和活力检测,以了解细胞的生长情况和健康状态。
人涎腺腺样囊性癌细胞;ACC-2 | 人卵巢癌细胞;Anglne |
人肺腺癌细胞;SPC-A-1 | 鹿衔草 对照药材 |
人T淋巴瘤细胞;HUT 102 | 番石榴叶 对照药材 |
Hela 细胞耐药亚株;HeLa /DDP | 槐角 对照药材 |
COC1细胞耐药亚株;COC1/DDP | 矮地茶 对照药材 |
人肝癌细胞;SMMC-7721 | 布渣叶 对照药材 |
人结直肠腺癌细胞;SW480 [SW 480;SW-480] | 松塔 对照药材 |
小鼠睾丸上皮细胞15P-1(干细胞库保藏) | 葶苈子(播娘蒿) 对照药材 |
人舌鳞癌细胞;Tca-8113 [Tca8113] | 皂角刺 对照药材 |
人肝癌细胞;Hep-3B [Hep3B] | 牛大力(美丽崖豆藤) 对照药材 |
人胎盘绒膜癌细胞;BeWo | 乌梅 对照药材 |
人成骨肉瘤细胞;MG-63 | 水翁花 对照药材 |
人成骨肉瘤细胞;Saos-2 | 小鼠口腔上皮细胞毛诃子 对照药材 |
人膀胱移行细胞癌细胞;T24 | 天山雪莲 对照药材 |
5-磷吡哆醛 | 细辛(北细辛) 对照药材 |
一、取材与分离
1. 快速操作
- 组织取材后需立即处理,避免长时间暴露于室温或非营养环境。
- 使用无菌 PBS 或生理盐水冲洗组织,去除血液、杂质。
2. 消化酶选择
- 根据组织类型选择消化酶,避免过度消化导致细胞损伤。
- 消化时间需严格控制(通常 10-30 分钟),可通过显微镜观察细胞解离状态。
二、培养条件优化
1. 培养基选择
- 使用含血清或特定生长因子的培养基(如 DMEM、RPMI 1640 等),部分细胞需添加胰岛素、EGF 等。
- 避免频繁更换培养基品牌或批次,减少细胞适应压力。
2. 贴壁与传代
- 原代细胞贴壁能力较弱,可能需要包被培养皿(如胶原蛋白、多聚赖氨酸)。
- 传代时密度建议控制在 70%-80%,过度汇合会导致接触抑制和分化。
三、污染控制
1. 无菌操作
- 全程在超净台操作,使用一次性耗材,避免交叉污染。
- 培养基中可添加双抗,但长期使用可能影响细胞活性。
2. 支原体检测
- 定期检测支原体污染(如 PCR 法),污染后需及时丢弃细胞。
四、状态监控
1. 日常观察
- 每天检查细胞形态、密度及培养基颜色,及时更换培养基(通常每 2-3 天换液一次)。
- 异常形态(如细胞变圆、碎片增多)可能提示污染或营养不足。
2. 传代与冻存
- 原代细胞分裂次数有限(一般 5-10 代),需及时冻存早期代次细胞。
- 冻存液建议使用 DMSO+血清(或专用冻存培养基),梯度降温后液氮保存。