小鼠三叉神经元分离自三叉神经组织;三叉神经为最粗大的混合性脑神经,含一般躯体感觉和特殊内脏运动两种纤维。其特殊内脏运动纤维起于脑桥中段的三叉神经运动核,纤维组成三叉神经运动根,由脑桥基底部与脑桥臂交界处出脑,位于感觉根下内侧,最后进入三叉神经第3支下颌神经中,经卵圆孔出颅,随下颌神经分支分布于咀嚼肌等。运动根内还含有三叉神经中脑核有关的纤维,主要传导咀嚼肌的本体感觉。三叉神经内以躯体感觉神经纤维为主,这些纤维的细胞体位于三叉神经节(半月节)内,该神经节位于颅中窝颧骨岩部的前面三叉神经压迹处,为硬脑膜形成的美克尔腔包裹。三叉神经节由假单极神经元组成,其中枢突集中构成了粗大的三叉神经感觉根,由脑桥基底部与脑桥臂交界处入脑,止于三叉神经诸感觉核,其中传导痛温觉的纤维主要终止于三叉神经脊束核;传导触觉的纤维主要终止于三叉神经脑桥核。三叉神经节细胞的周围突组成三叉神经三大分支,即第1支眼神经、第2支上颌神经、第3支为下颌神经。从3大分支不断分支分布于面部皮肤、眼及眶内、口腔、鼻腔、鼻旁窦的粘膜、牙、脑膜等,传导痛、温、触等多种感觉。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠三叉神经元采用yi蛋白酶消化法结合神经元专用培养基培养、化学试剂抑制法筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠三叉神经元经β-Tubulin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 小鼠三叉神经元细胞 | 组织来源 | 三叉神经组织 |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 包装 | T25培养瓶 |
货号 | GOY-01X1414 | 细胞形态 | 神经元细胞样 |
本公司所有产品仅供科学实验,不做其他科学实验外的使用!
包被条件 PLL(0.1mg/ml)
培养基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 神经元细胞样
传代特性 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液 0.25%yi蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
准备工作
1. 实验器材准备:准备无菌的培养皿、培养瓶、移液管、离心管、手术器械等,并进行高压灭菌或其他合适的消毒处理。
2. 试剂准备:配制或购买合适的培养基、消化酶(如、胶原酶等)、胎牛血清、双抗等试剂,确保其无菌且在有效期内。
3. 实验动物或组织来源准备:根据实验需求,选择合适的动物并进行相应的麻醉或处死,获取所需组织;或从已有的组织样本库中获取组织。
取材与处理
1. 取材:在无菌条件下,迅速取出目标组织,尽量减少对组织的损伤,并去除多余的脂肪、结缔组织等非目的组织。
2. 清洗:将取出的组织用预冷的无菌PBS冲洗数次,以去除血液和杂质。
3. 剪切:将组织剪成约1 - 2mm³的小块,以便后续消化。
细胞分离
1. 消化:将剪碎的组织块放入含有适量消化酶的离心管中,在37℃恒温摇床或培养箱中消化一段时间。期间可轻轻摇晃离心管,使消化更均匀。
2. 终止消化:当组织块大部分被消化成单细胞悬液或小细胞团时,加入含血清的培养基终止消化。
3. 过滤与离心:用细胞筛过滤细胞悬液,去除未消化的组织碎片,然后将滤液以适当的转速离心,收集细胞沉淀。
细胞观察与检测
1. 日常观察:每天用倒置显微镜观察细胞的形态、生长状态、密度等,记录细胞的变化情况,如发现细胞污染或异常,及时采取相应措施。
2. 细胞计数与活力检测:在需要时,可采用台盼蓝染色等方法对细胞进行计数和活力检测,以了解细胞的生长情况和健康状态。
一、取材与分离
1. 快速操作
- 组织取材后需立即处理,避免长时间暴露于室温或非营养环境。
- 使用无菌 PBS 或生理盐水冲洗组织,去除血液、杂质。
2. 消化酶选择
- 根据组织类型选择消化酶,避免过度消化导致细胞损伤。
- 消化时间需严格控制(通常 10-30 分钟),可通过显微镜观察细胞解离状态。
二、培养条件优化
1. 培养基选择
- 使用含血清或特定生长因子的培养基(如 DMEM、RPMI 1640 等),部分细胞需添加胰岛素、EGF 等。
- 避免频繁更换培养基品牌或批次,减少细胞适应压力。
2. 贴壁与传代
- 原代细胞贴壁能力较弱,可能需要包被培养皿(如胶原蛋白、多聚赖氨酸)。
- 传代时密度建议控制在 70%-80%,过度汇合会导致接触抑制和分化。
三、污染控制
1. 无菌操作
- 全程在超净台操作,使用一次性耗材,避免交叉污染。
- 培养基中可添加双抗,但长期使用可能影响细胞活性。
2. 支原体检测
- 定期检测支原体污染(如 PCR 法),污染后需及时丢弃细胞。
四、状态监控
1. 日常观察
- 每天检查细胞形态、密度及培养基颜色,及时更换培养基(通常每 2-3 天换液一次)。
- 异常形态(如细胞变圆、碎片增多)可能提示污染或营养不足。
2. 传代与冻存
- 原代细胞分裂次数有限(一般 5-10 代),需及时冻存早期代次细胞。
- 冻存液建议使用 DMSO+血清(或专用冻存培养基),梯度降温后液氮保存。
抗抗人垂体泌乳杂交瘤细胞;PRL1 | 抗抗人垂体泌乳杂交瘤细胞;PRL2 |
抗精核蛋白;HP1 | 糯稻根 对照药材 |
抗精核蛋白;HP2 | 黄根 对照药材 |
抗精核蛋白;HP3 | 川射干 对照药材 |
抗小鼠杂交瘤细胞;D7 | 藤合欢(南蛇藤果) 对照药材 |
抗孕酮杂交瘤细胞;P01 | 合欢皮 对照药材 |
抗人绒毛膜促性α杂交瘤细胞;H80X | 草果 对照药材 |
小鼠颈动脉成纤维细胞 | 葛根 对照药材 |
抗人绒毛膜促性b杂交瘤细胞;H10X | 弗朗鼠李皮 对照药材 |
抗人绒毛膜促性杂交瘤细胞;HN4 | 土鳖虫(地鳖) 对照药材 |
小鼠胚胎细胞;SC-1 | 荜澄茄 对照药材 |
抗乙型肝炎病毒表面抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株;HBS-r6 | 母丁香 对照药材 |
抗丙型肝炎病毒核心抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株;HCV-C39 | 小鼠三叉神经元细胞龙胆(龙胆) 对照药材 |
抗丙型肝炎病毒NS3抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株;HCVNS3-57 | 甘青青兰 对照药材 |
单道定时器 | 茅膏菜 对照药材 |