脂肪组织分化相关蛋白抗体 样本的物种 应选择物种相同或有交叉反应的抗体,抗体可能与不同物种的同种靶蛋白有交叉反应,因其氨基酸序列同源性较高,如果样本的种类未列入抗体说明书上的交叉反应种属表中,并不意味着该抗体不适用于检测该物种的蛋白,而只是表示该物种尚未用此抗体检测验证过,应通过序列比对的方法来预测交叉反应,可应用Expasy 和 NCBI BLAST 来进行不同物种蛋白同源性比对。
脂肪组织分化相关蛋白抗体一抗宿主物种的选择一般说来,在使用偶联二抗结合无偶联物的一抗时,一抗宿主动物的物种选择较为重要,对于免疫组化而言,尽可能选择与样本不同种系物种的一抗,从而避免二抗与样本内源性免疫球蛋白产生交叉反应,例如:检测小鼠样本蛋白,则不应选择小鼠或大鼠源的一抗,选兔源的一抗,则二抗则可选择偶联了检测分子(酶、荧光素、等)的抗兔IgG。
如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况,除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法,则抗体宿主物种的影响不大,如对不含IgG 的细胞裂解物样本的western blotting检测,尽管如此,含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白,还原变性样本中含IgG,在western blot 检测中则结合出现IgG 分子50 and 25 kDa 的重链和轻链条带。
二抗的选择 二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建议检查二抗说明书确保该抗体适用于你的检测应用, 二抗一般连接荧光素FITC 或发光团。
上海谷研生物科技有限公司特殊抗体的保存条件:
. 酶联抗体:永远保存在4 度,避免冻起来。否则会导致酶活性的下降或者丧失
2. 偶联抗体:所有偶联抗体都是在棕色管中或使用锡箔纸避光保存。尤其是荧光抗体,对
光极为敏感,因此在所有的实验阶段也是要避光操作的!
3. IgG3 的同型对照:永远保存在4 度,避免冻起来。因为如果出现冻融过程,该抗体非常
容易形成多聚体无论是保存还是运输,避免反复冻融!
反复冻融会导致抗体变性,导致多聚体形成,从而降低抗体的结合能力!
抗体保存其它相关信息:
YS-385B Anti-HAI- (Hepatocyte Growth Factor Activator Inhibitor )??肝细胞生长因子激活物抑制因子抗体
YS-386B Anti-HBA(hemoglobin alpha )??人类血红蛋白α抗体
YS-387B Anti-HRCAg/HBV(Mouse Anti-Human Hepatitis B Surface Antigen Monoclonal antibody) ??鼠抗人乙型肝炎表面抗原抗体
YS-388B Anti-HBV/pre S/S2 protein??抗乙肝病毒pre S/乙肝病毒pre S2抗体
YS-389B Anti-β-HCG (anti-Human Chorionic Gonadotropin (hCG) beta , for conjugation and detection)??鼠抗人β亚基单抗
YS-390B Anti-HCCR-(BRI3 binding protein)??人宫颈癌基因/bri3结合蛋白抗体
YS-39B Anti-α -HCG(anti-Human Chorionic Gonadotropin (hCG) α )??鼠抗人α 亚基(α -HCG)单抗
YS-392B Anti-HCV-Core??丙型肝炎病毒-C区抗体
YS-393B Anti-HCV-HCBP/ACY-3(Hepatitis C virus core-binding protein )??丙型肝炎病毒核心蛋白结合蛋白-抗体
YS-394B Anti-HCV-NS??丙型肝炎病毒-NS抗体
YS-395B Anti-HCV-NS3??丙型肝炎病毒-NS3抗体
YS-396B Anti-HCV-NS4a??丙型肝炎病毒-NS4a抗体
YS-397B Anti-HDL-R(High Density Lipoprotein Receptor)??高密度脂蛋白受体抗体
YS-398B Anti-Heamachrome??血红素抗体
关于加入甘油保存:有些人会加50%的甘油到抗体中来避免反复冻融,甘油在-20 度 会降低冰点。这对很多抗体可能是可行的。但是abcam 仅对非常小的一部分抗体检测过其在这种条件下的稳定性;而abcam 只对按照条件保存的抗体提供质量保证!加入甘油的溶液不建议在-80 度保存,因为这已经超过了甘油的冰点。如果您要加入甘油来保存抗体的话,请谨慎注意无菌操作,避免污染!
关于蛋白保护剂:
蛋白在高浓度时更不容易降解( mg/ml 或者更高),这就是为什么在抗体中加入BSA 之类作为稳定剂的原因了;另一方面,加入的蛋白也可以减少抗体由于管壁吸附所造成的损失。但是如果抗体要用来标记的话,则不能加入蛋白稳定剂,因为这些稳定剂会和抗体一起竞争结合标记物。