Phospho-beta-Arrestin (Ser42) /FITC 磷酸化β抑制蛋白抗体一抗宿主物种的选择一般说来,在使用偶联二抗结合无偶联物的一抗时,一抗宿主动物的物种选择较为重要,对于免疫组化而言,尽可能选择与样本不同种系物种的一抗,从而避免二抗与样本内源性免疫球蛋白产生交叉反应,例如:检测小鼠样本蛋白,则不应选择小鼠或大鼠源的一抗,选兔源的一抗,则二抗则可选择偶联了检测分子(酶、荧光素、等)的抗兔IgG。
如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况,除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法,则抗体宿主物种的影响不大,如对不含IgG 的细胞裂解物样本的western blotting检测,尽管如此,含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白,还原变性样本中含IgG,在western blot 检测中则结合出现IgG 分子50 and 25 kDa 的重链和轻链条带。
Phospho-beta-Arrestin (Ser42) /FITC 磷酸化β抑制蛋白抗体二抗的选择 二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建议检查二抗说明书确保该抗体适用于你的检测应用, 二抗一般连接荧光素FITC 或发光团。
双重染色抗体的选择用未偶联一抗进行细胞培养物或组织切片的双重免疫染色要求一抗来源于不同物种并且二抗分别识别其中之一,二抗说明书应描述其与其它物种来源的免疫球蛋有否有交叉吸附。
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荧光和化学发光标记连接于二抗的标记物是为了检测抗体的结合,选择标记物依赖于几个参数:检测方法:荧光或着色沉淀,荧光标记物用特殊波长的光激发时发射出可见
荧光素标记物要求水性封片介质,藻红蛋白(藻青素 / 藻红素要求不添加甘油的水性封片介