小鼠高敏三碘甲状腺原氨酸 u-T3ELISA试剂盒 酶联免疫吸附测定试剂盒
使用说明书elisa法测定
规格:48T/96T
本试剂盒仅供体外研究使用!
ELISA法定量测定人尿液或其它相关生物液体中小鼠高敏三碘甲状腺原氨酸 u-T3ELISA试剂盒的含量。
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操作步骤 实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起小鼠高敏三碘甲状腺原氨酸 u-T3ELISA试剂盒 检测范围。
. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液00μl,余孔分别加标准品或待测样品00μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应20分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加标记抗体工作液 00μl(取μl标记抗体加99μl标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡-2分钟,200μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同标记抗体工作液) 00μl,37℃,60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡-2分钟,200μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔显色不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后5分钟以内进行检测。
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