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ELISA的技术—细胞伤口愈合实验

更新时间:2015-04-30 点击量:558

ELISA试剂盒技术实验步骤:

. 细胞在含有0%FBS的DMEM培养基中生长。

2. 细胞以一定密度接种到24孔细胞培养板中,生长24小时后,单层细胞融合度应达到70-80%。

3. 不要更换培养基。用新的ml枪头轻轻的在单层培养细胞间划痕,划痕横穿过孔,枪头尽量与板孔的底部垂直,不要倾斜。这样产生的gap的距离才与枪头末端的外直径相等。Gap的距离可以选用不同型号的枪头调节。划痕在同一方向成一条直线。

4. 在垂直与*条划痕的方向制作另一条划痕,每孔划痕成十字交叉型。

5. 划痕后,用培养基轻轻的清洗板孔2次,以去除脱落细胞。

6. 每孔添加新鲜培养基。

7. (培养基中含有某些成分,如抑制/促进细胞迁移和/或增殖的化学物质)。

8. 细胞生长48小时(或根据时间需要)。

9. xPBS清洗细胞两次,然后使用3.7%多聚甲醛固定30分钟。

0. 0.%的结晶紫(2%乙醇溶解)染色30分钟。

. 染色的单层细胞选取不同的视野,显微镜拍照。ELISA试剂盒gap的距离可通过Photoshop或ImagJ软件测量.为了降低实验结果的可变性,建议每孔选择多个视野观察,每组做多个重复。

20mg 十七碳酸甲酯 含量测定 常温,避光 694-20050
20mg 槐角苷 含量测定 常温,避光 695-20050
20mg 芒柄花素 鉴别 常温,避光 703-200602
0.2ml (-)-薄荷酮 GC法含量测定 常温,避光 705-200602
0.2ml 胡薄荷酮 含量测定 常温,避光 706-20004
20mg ,5-O-二咖啡酰奎宁酸 含量测定 常温,避光 77-20050
20mg 3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇 常温,避光 724-
20mg 柳穿鱼叶苷 含量测定 常温,避光 728-2000
20mg 6-羟基-7-甲氧基香豆素 含量测定 常温,避光 74-20050
20mg 当药苷 含量测定 常温,避光 742-20050
ml 正丁醇 含量测定 常温,避光 743-20050
0mg -羟基-3,4,5-*氧基山酮 含量测定 常温,避光 744-20050
ml 醋酸乙酯 含量测定 常温,避光 746-20050
ELISA试剂盒20mg 20(S)-原人参二醇 含量测定 常温,避光 747-20050
20mg 20(S)-人参皂苷Rh2 含量测定 常温,避光 748-20050
00mg 左旋樟脑 GC法含量测定 常温,避光 749-20060
0.2ml 薏苡仁油 鉴别 常温,避光 750-20060


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