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人CD44变体6ELISA检测试剂盒​操作步骤

更新时间:2021-09-28 点击量:430

人CD44变体6ELISA检测试剂盒操作步骤:


. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔0孔,在di一、第二孔中分别加标准品00μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取00μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为80 ng/L,20 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,5 ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品0μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色5分钟.

0. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后5分钟。

人结直肠腺癌细胞;HT-29

人巨细胞白血病细胞株;Mo7e

人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H57

人前列腺癌细胞;PC-3 [PC3]

人红系白血病细胞;TF-

人乳腺导管瘤细胞;UACC82

人类原巨核细胞型白血病细胞;UT-7

人恶性黑色素瘤细胞;A-375 [A375]

人乳腺导管瘤细胞;BT-474

人结直肠腺癌细胞;COLO 205

人结直肠腺癌细胞;COLO 320DM [COLO320DM]

人Burkkit淋巴瘤细胞;Daudi

人十二脂肠腺癌;HuTu-80

人鼻咽癌细胞;CNE-2Z

人胎盘绒膜癌细胞;BeWo

人结直肠腺癌细胞;HCT 6 [HCT6]

人T淋巴瘤转基因细胞;Jurkat D,E

人T淋巴瘤细胞Jurkat亚系;Jurkat77

人口腔表皮样癌细胞;KB

人结直肠腺癌细胞;LoVo

人结直肠腺癌细胞;SW480 [SW 480;SW-480]

急性T淋巴细胞白血病细胞;TALL-04

人肾癌细胞;A498

人宫颈癌细胞;C-33A

人宫颈癌细胞;Hela 229 [HeLa229]

人宫颈癌细胞;Hela P0s-F

人宫颈癌细胞;Hela S3 [HeLaS3]

人胰腺腺泡上皮癌;HPAC

人T淋巴细胞白血病细胞;HuT 78

人肺鳞癌细胞;NCI-H520

人前列腺癌高转移细胞株;PC-3M IE8

人前列腺癌低转移细胞株;PC-3M-2B4

人肺巨细胞癌高转移细胞株;PG-BE

人肺巨细胞癌低转移细胞株;PG-LH7

人结直肠腺癌细胞;SW620 [SW 620;SW-620]

人脑星形胶质母细胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]

人肺癌细胞;A-427 [A427]

人胰腺癌细胞;AsPC-

人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;C98

人髓母细胞瘤细胞;Daoy

人乳腺导管癌细胞;HCC38

人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;M69

人胃癌细胞;MGC-803

绿色荧光蛋白标记人胃癌细胞;MGC803-GFP

人胃癌细胞;MKN-45

人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;MuM-2B


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