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原代组织细胞的解离

更新时间:2016-08-05 点击量:858

.用灭菌的解剖刀或剪刀将组织切成3-4mm大小碎块。用Hanks平衡盐溶液(HBSS)将组织碎块清洗数次。
2.加入胶原酶(50-200单位/ml胶原酶HBSS)。
3.在37℃ 下孵育4-8小时。加入3mM CaCl2 可以提高解离效率。
4.用灭菌的不锈钢网或尼龙网过滤细胞悬浮液,将离散的细胞和组织片段与大块的组织碎片分离。如需进一步解离,可向组织片段中加入新鲜的胶原酶。
5.通过离心HBSS清洗细胞悬浮液数次。
6.用培养基重悬细胞。计算细胞个数,然后接种细胞进行培养。

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