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向培养基细胞里面加入生长因子的方法讨论

更新时间:2014-08-19 点击量:4853

向培养基细胞里面加入生长因子的方法讨论

  生长因子绝大多数哺乳类胚胎神经元有严格的营养要求,若不能提供适宜的生长因子或合适的因子组分,将会使绝大多数神经元在体外培养的数天中死亡。解决这一问题有两条思路,一是让培养基细胞提供自己的营养因子,二是在培养基中加入纯的生长因子。如果细胞混合物能在高密度时生长,所需的生长因子便会积累到可观的数值,尤其当培养基很少变化时。若某种细胞混合物生长时有很少的营养需求,可保持培养基在一段时间里不作任何变动,以使营养(生长)因子积累,而zui后促使所需要的细胞类型能够生长。但是,这种对营养(生长)因子自身倚赖性亦有弊端,因为通常在混合细胞群体中细胞很难有同比例增殖,某些细胞会因生长条件的贫乏而受限制。另外,这种方法只能进行相当高密度的细胞培养。因为培养基的条件在细胞的较低密度时变的不够有效。不过某些时候纯化神经元群体的低密度培养可用条件培养基(经过了高密度培养)进行,或在胶质上生长的神经元所用过的培养基来支持。

  满足神经元营养需求的第二条途径是向培养基中加入生长因子。通常用于组培的通用适宜因子是神经生长因子NGF。不过,只有少数对这种蛋白质有反应的细胞类型的细胞才能生长。

含225ml LB肉汤均质袋 0个/包 用于李斯特氏菌制样和前增菌培养(GB 标准)
LB Broth
萘啶酮酸 5.0mg/支*5 每支添加于225ml HBJ005中制成LB肉汤
Nalidixic Acid
吖啶黄素 3.0mg/支*5 培养基每支添加于225ml HBJ005中制成LB肉汤
Acridine Flavin
含225ml FB增菌液均质袋 0个/包 用于李氏菌前增菌培养(SN 标准)
FB Broth
FB(Half-Fraser)添加剂(A、B) 2ml/支*40 每支添加到225ml HBJ006中
FB additive(A、B)
含225ml GN增菌液均质袋 0个/包 用于志贺氏菌前增菌培养
GN Enrichment Broth
含00ml GN增菌液均质袋 0个/包 用于志贺氏菌前增菌培养
GN Enrichment Broth
含225ml志贺氏菌増菌肉汤均质袋 0个/包 用于志贺氏菌前增菌培养
Shigella Enrichment Broth
新生霉素 ml/支*5 每支添加于225ml HBJ8663中
Novobiocin
培养基含225ml 7.5%氯化钠肉汤均质袋 0个/包 用于金葡菌前增菌培养
7.5% NaCl Broth
含50ml 7.5%氯化钠肉汤均质袋 0个/包 用于金葡菌增菌培养
7.5% NaCl Broth
含225ml 0%氯化钠胰酪胨大豆肉汤均质袋 0个/包 用于金葡菌前增菌培养
0% NaCl Trypticase Soy Broth
含225ml布氏肉汤均质袋 0个/包 用于空肠弯曲菌的前增菌
Brucella Broth

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