1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。
猪多巴胺(DA)免疫试剂盒AMSH信号转导衔接结合蛋白抗体
猪端粒酶(TE)免疫试剂盒ASB3锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族3抗体
猪凋亡相关因子(FAS/CD95)免疫试剂盒Aurora C有丝分裂激酶B抗体
猪淀粉样前体蛋白(βAPP)免疫试剂盒Phospho-Ack1 (Tyr284)磷酸化Ack1抗体
猪低氧诱导因子1α(HIF-1α)免疫试剂盒Phospho-Ack1 (Tyr326)磷酸化Ack1抗体
猪低分子肝素(LMWH)免疫试剂盒Phospho-beta-Arrestin 1 (Ser412)磷酸化β抑制蛋白1抗体
猪弹性蛋白(ELN)免疫试剂盒Phospho-Aurora A (Thr288)磷酸化有丝分裂激酶A抗体
猪单核细胞增多性李斯特菌素O((LLO)免疫试剂盒Aurora A有丝分裂激酶A抗体
猪单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫试剂盒AIM2干扰素诱导蛋白AIM2抗体
猪催乳素(PRL)免疫试剂盒Aquaporine 2水通道蛋白-2抗体
猪促生长激素释放激素(GHRH)免疫试剂盒ARMCX3ARM重复X连锁蛋白ARMCX3抗体
猪促肾上腺皮质激素(ACTH)免疫试剂盒ARMCX1ARM重复X连锁蛋白ARMCX1抗体
猪促卵泡素(FSH)免疫试剂盒ARMCX2ARM重复X连锁蛋白ARMCX2抗体
猪促甲状腺素释放激素(TRH)免疫试剂盒Apg10自噬相关蛋白10抗体
猪雌激素(E)免疫试剂盒Aminoacylase 1氨基酰化酶1抗体
猪雌二醇受体(ER)免疫试剂盒Adipose Triglyceride Lipase脂肪甘油三酯脂酶抗体
猪雌二醇(E2)免疫试剂盒phospho-AMPK alpha-1 (Thr172)磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体
猪成纤维细胞生长因子19(FGF19)免疫试剂盒Amphiregulin双调蛋白(结肠直肠细胞源性生长因子)抗体
猪肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)免疫试剂盒phospho-AQP2(Ser264)磷酸化水通道蛋白2抗体
猪肠三叶因子(ITF)免疫试剂盒AXL粘附相关激酶抗体