1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜,37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制),酶标板加上覆膜,37℃温育1小时。
3.弃去孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大约350μl /每孔,甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl,加上覆膜,37℃温育1小时。
5.弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显况酌情缩短或延长,但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止)。
7.每孔加终止液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。
9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。
地衣芽孢杆菌
Oceanicola batsensis 模式菌株
Citreicella aestuarii 模式菌株
Litorimicrobium taeanense 模式菌株
Loktanella pyoseonensis 模式菌株
Maritalea myrionectae 模式菌株
Spongiibacter marinus 模式菌株
Phaeobacter inhibens 模式菌株
Fulvimarina pelagi 模式菌株
Aurantimonas coralicida 模式菌株
Psychrobacillus insolitus 模式菌株
罗伊氏乳杆菌 模式菌株
惰性解油螺旋菌
粪肠球菌(粪链球菌) 研究;发酵酸奶
鲍曼不动杆菌
大肠埃希氏菌(大肠杆菌)
越南伯克霍尔德氏菌
西伯利亚库特氏菌 模式菌株
Viridibacillus arenosi 模式菌株
Rummeliibacillus stabekisii 模式菌株
蜡状芽孢杆菌 模式菌株
敏捷食酸菌
Thalassospira permensis 模式菌株
Pseudomonas luteola 模式菌株
Maritimibacter alkaliphilus 模式菌株
Herbaspirillum canariense 模式菌株
Herbaspirillum aurantiacum 模式菌株
Herbaspirillum soli 模式菌株
Sphingomonas yunnanensis 模式菌株